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- 2021-09-09 发布于山东
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复 习基因工程的三种工具限制酶切割产生的两种末端DNA连接酶的两个种类运输工具的常见种类 专题1 基因工程1.2 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序(1)目的基因的获取(2)基因表达载体的构建(3)将目的基因导入受体细胞(4)目的基因的检测与鉴定一、目的基因的获取1、目的基因:2、获取方法:主要指的是编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子。(1)自然界分离(2)人工方法合成(1)从基因文库中获取目的基因(2)利用PCR技术扩增目的基因(3)通过DNA合成仪用化学方法直接合成基因组文库基因文库 部分基因文库(cDNA文库)(1)从基因文库中获取目的基因Ⅰ、什么叫基因文库?Ⅱ、基因文库的类型补:原核细胞和真核细胞的基因结构编码相同数目氨基酸的蛋白质,原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗?思考Ⅲ.基因文库的构建方法①:直接分离法(鸟枪法)多用于原核生物(2)反转录法(cDNA文库的构建方法)(3)根据已知的氨基酸序列合成DNA法上述三种目的基因提取的方法有何优缺点?优点缺点鸟枪法反转录法根据已知氨基酸合成DNA法工作量大,盲目,分离出来的有时并非一个基因操作简便广泛使用操作过程麻烦,mRNA很不稳定,要求的技术条件较高专一性强仅限于合成核苷酸对较少的简单基因专一性最强思考: 如何从基因文库中得到所需要的基因?(获得目的基因的依据是什么?)依据:目的基因的有关
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