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酵母细胞的固定化教案
专题4 酶的研究与应用 课题3 酵母细胞的固定化 【教学目标】 1.说出固定化细胞的作用和原理。 2.了解固定化细胞常用的方法和载体材料。 3.尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 【教学重点】 制备固定化酵母细胞。 【教学难点】 制备固定化酵母细胞。 【教学方法】 实验法 【教学准备】 PPT课件、实验材料(干酵母、海藻酸钠、无水CaCl2、蒸馏水)、实验仪器(烧杯、玻棒、酒精灯、三脚架、石棉网、注射器等) 【教学过程】 I、引入 图片:传统酿酒作坊酿酒过程图片 思考:有什么方法可以使酵母细胞从反应产物中分离并被重复使用呢? II、新课 一、固定化细胞技术 引入固定化细胞技术的概念,了解常用的载体。 二、制备固定化酵母细胞 阅读教材P50—51实验操作步骤,思考: (1)制备过程包括哪几个步骤?应该注意哪些问题? (2)你认为哪个步骤的操作是最重要的一环? (一)制备固定化酵母细胞 1.酵母细胞的活化: 称取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml,搅拌均匀成糊状,放置1小时,使其活化。 活化就是处于状态的微生物重新恢复正常生活状态。 2.配制物质的量尝试为0.05mol/L的CaCl2溶液 称取无水CaCl2g,放入ml烧杯中,加入ml蒸馏水,充分溶解。 3.配制海藻酸钠溶液 (1)称取g海藻酸纳,放入ml小烧杯中,加入10ml 水。 (2)称取g海藻酸纳,放入ml小烧杯中,加入水。 (3)用酒精灯加热。加热溶化海藻酸钠时要注意:用或,边,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化。 4..海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液至室温,加入已的酵母细胞,充分搅拌,使其混合均匀,再转移至中。 5.固定化酵母细胞 以的速度地将注射器中的溶液滴加到配制好的溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶球的情形,并适当调整注射器与液面的。将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡min,以便形成稳定的结果。 6 思考:如何通过凝胶珠的颜色、形状来判断细胞固定化是否成功?上表说明 如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明;如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明; 小贴士:检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: ①用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠制作成功。 ②在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 (二)用固定化酵母细胞发酵 1.将固定好的酵母细胞用冲洗2-3次。 2.发酵时的温度为,时间。 3.观察利用固定化酵母细胞发酵的葡萄糖溶液,看看是否有产生,闻闻是否有。 (三)总结与反思: 1.是操作中最重要的一环,决定实验的成败。 2.涉及固定化细胞的质量。如果,将很难形成凝胶珠;如果,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少,影响实验效果。 【练习与巩固】 1.关于酵母细胞活化的说法,不正确的是( )。 A.酵母细胞活化就是由无氧呼吸变成有氧呼吸 B.酵母细胞活化所需要的时间较短 C.活化就是让处于休眠状态的细胞恢复生活状态 D.酵母细胞活化后体积增大 2.使用固定化细胞的优点是( )。 A.能催化大分子物质的水解B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近D.有利于酶在细胞外发挥作用 3.下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是( ) A.琼脂糖 B.醋酸纤维素 C.聚丙烯酰胺D聚乙烯树脂 4.下列关于固定化细胞的叙述,正确的是 ( ) A.催化效率高,低耗能、低污染 B.对环境的条件非常敏感,容易失活 C.既能与反应物充分接触,又能与产物分离 D.成本低、操作简单,但反应效率可能很低 5.溶解海藻酸钠,最好采用下列哪种加热的方法 ( ) A.小火间断 B.小火持续 C.大火间断 D.大火持续 6.对配制海藻酸钠溶液的叙述不准确的是( )。
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