染菌及其相干的问题经典.docVIP

染菌概括及其有关的问题 一、染菌的观点及其对发酵的影响 “染菌 ” 是因 “ 纯种发酵 ”而存在。 理论上，战胜染菌的方法只有二种：杀灭杂菌和阻拦杂菌。“杀灭杂菌 ”—— 湿热、干热、射线和化学药品（药物）灭菌法。“阻拦杂菌 ”—— 过滤（绝对过滤和相对过滤） 染菌对微生物发酵所造成的危害可因生产品种，杂菌种类，污染时间，污染 程度等的不一样而不一样。但起码包含： 1、培育基及能源的浪费； 2、扰乱了正常代 谢或耗费营养而减少产量； 3、发酵液性状改变而影响提取过程和降低提取收率； 4、产质量量难以保证； 5、增添三废办理难度； 6、打乱生产计划； 7、提升劳动 强度； 8、影响人们情绪； 9、经济损失。 举例：青霉素发酵染细菌；头孢菌素 C、制霉菌素发酵染细菌；噬菌体污染。 二、从微生物自己的生长特征剖析染菌过程 1、微生物的一般特征：个体小，非成群生长时肉眼看不见；是生物，有极强 的生命力；对环境的适应能力强，变异也快；条件合合时生长快速。 2、微生物的构造：芽孢 —— 某些杆菌在生长到必定阶段后，细胞浆脱水浓缩， 在细胞的中间或顶端形成了椭圆形或圆形的小体，这就是芽孢。芽孢的含水量很 少，芽孢壁很厚，与环境的互换率低（即芽孢壁的通透性很低） ，抗干燥能力和抗热性很强，对化学灭菌剂也有较好的耐受性，是杆菌的一种休眠体。当碰到适合 条件时即萌生成新的个体。噬菌体 —— 构造更加简单。 3、微生物的营养要乞降生长条件： pH 霉菌： 4～6，细菌和放线菌： 7.2 ～ 7.6 ，嗜碱杆菌能耐受 20% 浓度 的氨水。 温度 低温只好减慢或中断微生物的生命活动，而不易杀死微生物；高温能使微生物死亡，温度愈高死亡愈快。值得特别注意的是细菌的芽孢和霉菌、放线菌的孢子因为含有特别的成分和含有较少的水分而拥有更高的抗寒力和耐热性；细菌的芽孢富含钙离子和吡啶 —2、6— 二羧酸（简称 DPA），是细菌芽孢耐热的实质所在，在酸性或碱性条件下，细菌芽孢的耐热性会降低。 微 生 物 最低温度 适合温度 最高温度 —— 怎么定？数目依照是什么？ 嗜冷微生物 0 ℃ 5～10 ℃ 20～ 30 ℃ 嗜温微生物 5 ℃ 25～ 37 ℃ 45～ 50 ℃ 嗜热微生物 30 ℃ 50～ 60 ℃ 70～ 80 ℃ 通气 （需氧微生物、厌氧微生物、兼性厌氧微生物； O2，CO2，N2 ）。 4、不一样种类的微生物有不一样的生长特征：霉菌、放线菌、细菌、噬菌体即病 毒（形态、菌落、生长与生殖的速度，影响生长特征的要素有：培育条件、培育基成分） 5、微生物的个体大小（微米）： 微生物名称 细胞形状 径宽 径长 大肠杆菌 短杆状 0.4 ～ 1.0 ～ 大肠杆菌（活） 短杆状 1.0 ～ 2.0 ～ 一般变形杆菌 短杆状 0.5 ～ 1.0 ～ 一般变形杆菌（活） 短杆状 1.0 ～ 1.4 ～ 枯草杆菌 短杆状 0.5 ～ 1.6 ～ 枯草杆菌孢子 广椭圆形 0.5 ～ 0.9 ～ 巨大芽孢杆菌 短杆状 0.9 ～ 2.4 ～ 巨大芽孢杆菌（活） 短杆状 1.6 ～ 3.7 ～ 巨大芽孢杆菌孢子 广椭圆形（球杆状） 0.6 ～ 0.9 ～ 藤黄八叠球菌 球状 1.0 ～ 噬菌体 0.08 ～ 三、染菌过程的剖析（染菌的原由） 1、染菌时间确实定： 习惯上认定的染菌时间是指在无菌检查或显微镜下看到了杂菌后依据经验往前推。鉴识杂菌和判断染菌的主要依照：在显微镜下察看微生物的形态特点和统计数目；察看无菌操作追踪斜面上的菌落特点（应注意所使用的培育基）及出现 的时间等。 在宏观上或微观上看到了杂菌以前的若干小时 这个 “若干小时 ”的长短与杂菌进入纯培育系统时的数目有关，与纯培育系统的规模有关。明显侵入的杂菌越多，规模越小，则这个 “若干小时 ”越短。下表的计算固然烦杂，并且与实质状况相差甚远，但经过计算将有助于对杂菌进入 纯培育系统即真实的染菌时间作出判断。在实质工作中剖析染菌原由，采纳防备举措，都与这个真实的染菌时间有关。 假定杂菌入侵的数目在几十个（如种子罐接种时操作不严实而造成杂菌入侵）到数百万个（如设施细小损坏惹起的杂菌入侵） 。而在显微镜下能够察看到杂菌存 在时的杂菌浓度起码已经达到每毫升发酵液约二十万个，假如发酵罐中发酵液的 体积以 15 吨计，则杂菌总数已经达到了三万亿个（ 3×10 12 个）。从几十个或数百万个杂菌变为三万亿个杂菌是需要时间的，这段时间的长短随杂菌的种类不一样而 不一样，也随培育条件的不一样而不一样。 以大肠杆菌为例计算以下。大肠杆菌在最适培育条件（肉汤， 37℃，振荡， 处于对数生长久）下生殖一代所需要的时间是 20 分钟。若是在某一时辰有一个大 肠杆菌进入了发酵液，并且发酵液的体积是 15 吨（ 1.5 ×10 7