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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 113122533 A
(43)申请公布日
2021.07.16
(21)申请号 202010056986.X
(22)申请日 2020.01.16
(71)申请人 深圳华大基因股份有限公司
地址 518083 广东省深圳市盐田区洪安三
街21号华大综合园7栋7层-14层
(72)发明人 冯兵 张东
(74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限
公司 11245
代理人 何叶喧
(51)Int.Cl.
C12N 15/10(2006.01)
权利要求书1页 说明书6页
序列表7页 附图3页
(54)发明名称
一种去除动物总RNA中的核糖体RNA的方法
(57)摘要
本发明公开了一种去除动物总RNA中的核糖
体RNA的方法。本发明提供了一种去除动物总RNA
样本中的rRNA的方法,依次包括如下步骤:(1)取
动物总RNA样本,进行变性,然后采用特异引物组
进行反转录;所述特异引物组由若干条rRNA特异
性反转录引物组成;(2)采用RNase H酶进行处
理;(3)采用DNase I进行处理;(4)回收RNA。本发
明提供的方法具有以下优势:(1)从动物总RNA样
本中特异性去除rRNA,保留了其他目标RNA如
mRNA、LncRNA等,适宜于LncRNA测序;(2)物种耐
受度高,广泛适用于哺乳类、鸟类、爬行类、两栖
类、鱼类及昆虫类等总RNA样本中rRNA的去除;
A (3)操作简单、成本低廉且适宜于批量自动化工
3 作站操作。
3
5
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2
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3
1
1
N
C
CN 113122533 A 权 利 要 求 书 1/1 页
1.一种去除动物总RNA样本中的rRNA的方法,依次包括如下步骤:
(1)取动物总RNA样本,进行变性,然后采用特异引物组进行反转录;所述特异引物组由
若干条rRNA特异性反转录引物组成;
(2)采用RNase H酶进行处理;
(3)采用DNase I进行处理;
(4)回收RNA。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述特异引物组由40种引物组成,依次如序
列表的序列1至序列表的序列40所示。
3.权利要求1或2所述方法在制备RNA文库中的应用。
4.权利要求1或2所述方法在RNA测序中的应用。
5.特异引物组,由40种引物组成,依次如序列表的序列1至序列表的序列40所示。
6.权利要求5所述特异引物组在去除动物总RNA样本中的rRNA中的应用。
7.权利要求5所述特异引物组在制备RNA文库中的应用。
8.权利要求5所述特异引物组在RNA测序中的应用。
9.一种去除动物总RNA样本中的rRNA的试剂盒,包括元件甲、元件乙和元件丙;
所述元件甲用于rRNA的特异性反转录;
所述元件乙用于特异性消化DNA-RNA杂交双链中的RNA链;
所述元件丙用于消化DNA。
10.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于:
所述元件甲包括元件甲-1和元件甲-2;所述元件甲-1为特异引物组,所述特异引物组
由若干条rRNA特异性反转录引物组成;所述元件甲-2包括用于进行反转录的试剂盒或试剂
或试剂组合;
所述元件乙包括用于特异性消化DNA-RNA杂交双链中的RNA链的试剂盒或试剂或试剂
组合;
所述元件丙包
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