接头、接头文库及其应用发明专利.pdfVIP

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2021-09-11 发布于浙江
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接头、接头文库及其应用发明专利.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 110438121 A (43)申请公布日 2019.11.12 (21)申请号 201810414797.8 C40B 40/06(2006.01) C40B 50/06(2006.01) (22)申请日 2018.05.03 C12Q 1/6869(2018.01) (71)申请人深圳华大临床检验中心 C12Q 1/6806(2018.01) 地址 518083 广东省深圳市盐田区盐田街道北山工业区11栋1、3、5楼申请人广州华大基因医学检验所有限公司　深圳华大基因股份有限公司 (72)发明人邵迪　叶明芝　宋炎　 (74)专利代理机构北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 代理人赵天月 (51)Int.Cl. C12N 15/11(2006.01) C12N 15/10(2006.01) C40B 80/00(2006.01) 权利要求书2页说明书10页序列表2页附图4页 (54)发明名称接头、接头文库及其应用 (57)摘要本发明提供了一种接头。该接头包括：单链核酸段，所述单链核酸段由单链核酸形成，所述单链核酸段包括样本标签序列、随机序列、引物结合序列；以及双链核酸段，所述双链核酸段由双链核酸形成。该接头随机引物设置在接头的单链区，有利于接头上下游引物的退火，接头的连接效率以及建库模板DNA的利用率显著更高，接头处引入随机序列作为分子标签序列，可用于建库模板的DNA分子的特异性的标记，从而在测序序列中区分真实变异和建库或测序中引入的碱基错误，可用于对突变丰度低到1‰的基因进行检测。 A 1 2 1 8 3 4 0 1 1 N C CN 110438121 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种接头，其特征在于，包括：单链核酸段，所述单链核酸段由单链核酸形成，所述单链核酸段包括样本标签序列、随机序列、引物结合序列；以及双链核酸段，所述双链核酸段由双链核酸形成。 2.根据权利要求1所述的接头，其特征在于，所述双链核酸段具有3’粘性末端，并且所述双链核酸段的3’非粘性末端与所述单链核酸段的5’末端相连；优选地，所述的3’粘性末端为粘性T末端。 3.根据权利要求1所述的接头，其特征在于，所述样本标签序列的长度为4-10nt，所述随机序列的长度为6-10nt；优选地，所述随机序列的长度为6nt。 4.根据权利要求1所述的接头，其特征在于，沿着5’到3’的方向，所述单链核酸段包括样本标签序列、随机序列和引物结合序列；任选地，所述双链核酸段中3’非粘性末端所在的核苷酸链的5’端具有磷酸化修饰。 5.根据权利要求1所述的接头，其特征在于，所述标签序列具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；任选地，所述引物结合序列具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。