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医学免疫学实验技术
主 编 邱玉华
副主编 居颂光
苏 州 大 学
2010 年 2 月
目 录
1、外周血单个核细胞的分离…………………………………………… 3
2、T 淋巴细胞亚群的测定……………………………………………… 6
3、混合淋巴细胞反应………………………………………………… 10
4、淋巴细胞增殖的检测……………………………………………… 13
5、免疫荧光标记技术………………………………………………… 15
6、小鼠血清中 Ig 的含量测定………………………………………… 18
7、细胞因子的含量测定………………………………………………2 1
8、酶联免疫斑点分析………………………………………………… 25
9、人外周单核细胞来源树突状细胞的制备………………………… 29
10、小鼠腹腔细胞及巨噬细胞的制备………………………………… 32
11、多克隆抗体的制备………………………………………………… 35
12、B 淋巴细胞杂交瘤的建株………………………………………… 37
13、细胞周期的分析…………………………………………………… 40
14、双向免疫扩散技术………………………………………………… 42
15、免疫印迹技术……………………………………………………… 45
16、荷瘤动物模型的建立……………………………………………… 49
附件：免疫学实验常用试剂及配制方法……………………………… 51
2
实验 1 外周血单个核细胞的分离
(Abstraction of Peripheral blood Mononuclear Cell)
一、 目的要求
1、掌握外周血单个核细胞分离的原理和实际操作方法。
2、掌握离心机及显微镜等仪器的使用。
二、原理
外周血中单个核细胞（ PBMC）包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形状和比
重与其他血细胞不同。红细胞和粒细胞比重较大，为 1.092 左右，淋巴细胞和单
核细胞的比重为 1.075 ～1.090 之间，血小板比重为 1.030 ～1.035 。利用一种比重
为 1.077 左右、接
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