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绍兴文理学院司法鉴定中心作业指导书
页 号
第1页 共2页
修改次数
第1次修改
标题
血液中乙醇的检测作业指导书
审 核 人
刘 正
批 准 人
葛建荣
实施日期
2012年9月1日
目的
检测血液中乙醇含量。
2. 适用范围
本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。
3. 职责
技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。
4. 试剂与对照品
4.1 乙醇(色谱纯99%,Sigma)
4.2 乙醇溶液:精密称取乙醇1.0097g于100ml容量瓶内,添加蒸馏水至刻度,混匀,得10.00mg/ml乙醇储备液,将储备液用蒸馏水稀释至20倍,得0.50mg/ml乙醇控制液,放置样品室4℃冰箱保存,有效期为6个月。
4.3 叔丁醇(色谱纯99%,Chem Service)
4.4 内标叔丁醇溶液:精密称取叔丁醇0.5026g于100ml容量瓶内,添加蒸馏水至刻度,混匀,得5.00mg/ml叔丁醇储备液,将储备液用蒸馏水稀释至125倍,得40ug/ml叔丁醇内标工作液,放置样品室4℃冰箱保存,有效期为6个月。
4.5 乙醇标准溶液(Gerilliant)
乙醇标准溶液: 10mg/dl,20mg/dl,50mg/dl,80mg/dl,100mg/dl,200mg/dl,300mg/dl
5.血液中乙醇定性、定量的分析
5.1样品处理
用精密移液器取样品血0.10 mL及0.50 mL叔丁醇40μg/mL内标工作液2份,各加入样品瓶内,盖上硅橡胶垫,用密封钳加封铝帽,混匀,置于顶空自动进样器中加热10 min,待测。
5.2 气相色谱仪条件
色谱柱:DB-ALC1毛细管柱(30m′0.32mm′1.2mm)
柱温:恒温40°C
检测器:火焰离子化检测器(FID)
检测器温度:250°C
进样口温度:150°C
5.3顶空自动进样分析条件
DANI顶空自动进样器(配1mL定量进样环)工作条件:加热箱温度(Oven)65℃,定量环温度105℃,传输线温度(TR.Line)110℃,样品瓶加热平衡时间(Vial EQ.Time)10.0min,样品瓶加压时间(Pressuriz Time)0.10min,定量环充满时间(Loop Fill Time)0.10min,定量环平衡时间0.05min,进样时间(Inject Time)1.00min。
5.4记录
记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值,填入表中,并根据工作曲线定量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。
5.5定量结果评价
样品应同时平行测定两份,单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差(双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差)若不超过5%时(有凝血块的血样不超过10%),结果按两份样品结果的平均值计算,双样相对相差若超过5%时(有凝血块的血样超过10%),需要重新测定。
| C1- C2|
双样相对相差(%) = ????? ′ 100
C
C1、C2 为两份样品平行定量测定的结果。
式中C为两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+ C2)/ 2;
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