ELISA实验原理及操作.pptVIP

实验五 免疫酶技术及其应用——ELISA 一、实验目的 了解和掌握免疫酶技术的测定原理。 掌握酶联免疫吸附测定技术的操作步骤，学会利用竞争ELISA的方法，定量测定抗体或抗原。 了解免疫酶技术在生物学和医学研究的重要意义及应用价值。 二、实验原理 免疫标记技术（immunolabelling technique）: 是指用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂或电子致密物质等作为示踪剂，标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。 特点：高度灵敏、特异、快速，定性、定量、定位 分类：免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫技术、免疫电镜技术、免疫胶体金技术和发光免疫测定。 免疫酶技术(enzyme immunoassay)： 是将抗原和抗体的特异性免疫反应与酶的催化反应相结合而建立的一种免疫检测技术。 就是利用酶标记抗体或抗原，以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。 酶联免疫吸附试验ELISA （enzyme linked immunosorbent assay） 是一类常用的免疫酶技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。 常用的酶：辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶（AP）。 ELISA检测抗原 Ag + Ab* ? Ag-A