实验四茶叶中茶多酚含量的测定.docxVIP

精品文档 精品文档 PAGE PAGE #欢在下载 实验四茶叶中茶多酚含量的测定一一高镒酸钾直接滴定法 一、目的：掌握高镒酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作 二、原理 茶叶中茶多酚易溶于热水， 在用靛红作指示剂的情况下， 样液中能被高镒酸钾氧化的物 质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗 1mL 0.318g/mL的高镒酸钾相当于 5.82mg茶多酚的 换算系数，可计算茶多酚的含量。 三、仪器与试剂 仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、 500mL白瓷皿。 试齐?J: 1、0.1%靛红溶液：称取靛红 1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为 1.84的 浓硫酸50mL冷却后用蒸储水定容至 1000mL,如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛 红1g,加浓硫酸50mLi在80c烘箱或水浴中加热磺化 4~6h,用蒸储水定容至 1000mL过 滤后贮于棕色瓶中。 2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸 6.3034g ,用蒸储水溶解后定容至 1000mL 3、高镒酸钾标准溶液：称取 AR的高镒酸钾1.27g ,用蒸储水溶解后定容至 1000mL准确吸 取0.630%草酸溶液10mLi放入250ml锥形瓶中（平行 3份），加入蒸储水 50mL再加入相 对密度为1.84的浓硫酸10mL摇匀，在70~80c水浴中保温5分钟，取出后用高镒酸钾进 行滴定。开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡 红色保持1分钟不变即为终点。计算高镒酸钾溶液的百分比浓度。 四、测定步骤 1、供测试液的准备： 准确称取茶叶磨碎样品 1g,放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸储水 80mL,在沸水浴中浸 提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入 100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸储水定容至 100mL摇匀。 2、测定： 取200ml蒸储水放入白瓷皿中，加入 0.1%靛红溶液5mLi再加入供测试液 5mL开动磁 力搅拌器，用已标定的高镒酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以 1滴/s为宜，接近终点时 应慢滴。直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止， 记下消耗的高镒酸钾毫升数。同时做空白测 a￡o 五、结果计算 A B 0.00582 0.318 X= m V1 V2 式中：X一茶多酚的含量，% , B—空白消耗的高镒酸钾毫升数， mL A一样品消耗的高镒酸钾毫升数， mL s-高镒酸钾的浓度，% m-样品的质量g, V1—测定用供测试液的体积， mL , V2--供测试液的体积，mL 实验三 茶叶中茶多酚含量的测定 一一酒石酸铁比色法 一、实验目的： 1、掌握酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量的原理及操作。 2、进一步熟悉721—分光光度计的使用。 二、原理： 茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的 20%?35%,由约30种以上的酚类物质所组成，通 称茶多酚。按其化学结构分为四类：（1）儿茶素类，属黄烷醇类；（2）黄酮及黄酮醇类；（3） 花白素及花青素，即羟基-[4]-黄烷醇及其钾盐；（4）醋酸及缩酚酸类。其中以黄烷醇类 化合物最重要（占多酚的 80%左右）。纯儿茶素一般为白色无定形粉末，在空气中极易氧化 成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。 茶多酚能溶于水、 乙醇、 甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。对热、酸较稳定，2%勺溶液加热至120 C并保持30min, 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。 实验表明，茶多酚清除活性氧自由基作用的活性， 为等量维生素C的493倍，且能有效消除 脂质过氧化产物丙二醛，具有降血脂的显著功效。还有研究表明，茶多酚还具有抑制痢疾、 伤寒、霍乱、金黄色葡萄球菌等有害菌的作用；具有较强的抗放射性作用，以及在抗衰老， 抑制瘤细胞，预防心脑血管疾病等方面都显示出很好的效应， 是一种有开发前景的天然抗氧 化齐Jo 1988年7月我国已批准茶多酚作为食品添加剂。国内已建立了茶多酚工业化生产线， 并开发研制出了茶多酚的第二代产品即儿茶素（ TC）。 茶多酚的测定方法有高镒酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法， 由于高镒酸钾直接滴定法操作 比较复杂，且靠肉眼观察颜色判断终点， 如果样品溶液颜色较深时，可能影响测定结果。本 实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。 酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正 比。因此可以用比色方法测定。该法可避免高镒酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。 三、仪器与试剂： 仪器：分光光度计 试齐I」： （1）酒石酸铁溶液：称取 FeSO 7H2O 1.000g ,含4个结晶水的酒石酸钾钠 5.000g ,加 蒸储水溶解后，用蒸储水稀释至 1000mL （2） pH7.5 的磷酸缓冲液：60.2g NaHPO 12H2O , 5.00g