微生物检验项目性能验证课件.ppt

血培养性能验证常用留样验证和血培养系统平行比对两种方法。 本实验室采用的是留样验证的方法，操作过程参照?XJ-SOP-006细菌室检验工程性能验证?  验证应覆盖临床常见微生物 需氧成人/儿童血培养瓶验证菌株应包括:需氧/兼性 厌氧革兰阳性菌、需氧/兼性厌氧革兰阴性菌、苛养菌〔如：流感嗜血杆菌、肺炎链球 菌等〕和真菌， 厌氧血培养瓶验证菌株应包括兼性厌氧革兰阳性菌、兼性厌氧革兰阴 性菌、专性厌氧菌， 其他特殊用途血培养瓶参照厂家要求选择适宜类型菌株进行验 证。 验证要求 每种类型至少１株，总体不少于 15 株。应尽可能使用真实患者的临床别离菌株 〔性能验证用临床留样菌株宜经质谱或 DNA 序列分析确认〕。对于特殊、苛养菌可使 用标准菌株或质控菌株。 某些特殊菌株需要在培养瓶中参加无菌、未使用抗生素的厂 家推荐血液标本，如不加可能不生长，如流感嗜血杆菌。 验证要求 模拟临床血流感染患者的细菌含量。 假设苛养菌需添加适量的新鲜无菌血液〔成人瓶 5-10ml，儿童瓶 1-3ml〕后置于血培养系统上进行培养、检测。 验证方案 挑取培养18-24h的新鲜培养物，在生理盐水中调整为0.5麦氏浊度的菌悬液，然后倍比稀释。如下图 验证方案 0.5Mcf ~108CFU/ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml ~106CFU/ml ~104CFU/ml ~102CFU/ml 0.5ml #4 ~10CFU/ml 从#4号试管里取3ml菌悬液注入血培养瓶内，同时取1ml菌悬液在平板上进行涂布接种，确认接种数量。 将接种好的血培养瓶放入仪器进行监测， 待阳性报警后移种平板，涂片染色，确认是否为接种菌 验证方案 在厂家说明书规定时间内检测出所有菌株那么该方法通过验证。 3 天时间应足以 检测出至少 95%的临床相关细菌，须具备苛养菌、真菌、厌氧菌等的检出能力。 假设未能 检出应使用相同菌株进行重复试验来验证。假设仍不能检测，实验室和/或制造商应在临 床使用该系统前采取纠正措施。 可接受标准 如果血培养仪升级，原系统和新系统的差异不大，使用的培养瓶也没有改变，那么由供给商技术代表核查仪器性能即可，无需再次验证。功能核 查将对孵育系统和光学系统以及软件是否按照制造商规定运行进行评价。 可接受标准 菌株 BacTAlert 3D BECTEC FX 时间差 需氧培养瓶批号 1041828 需氧培养瓶批号 5155951 培养瓶条形码 报阳时间h 培养瓶条形码 报阳时间h 白色念珠菌 SFP11B2S 22.4 44922851842 17.14 5.26 铜绿假单胞菌 SFP11B42 16.56 449228951822 12.12 4.44 大肠埃希菌 SFP11B28 16.08 449228951816 9.77 6.31 肺炎链球菌 SFP11B1N 16.80 449228951801 19.01 2.21 甲型副伤寒沙门菌 SFP11B2N 14.88 449228951808 13.27 1.61 金黄色葡萄球菌 SFP11B39 18.96 449228951818 14.95 4.01 流感嗜血杆菌 SFP11C64 20.64 449228951850 12.75 7.89 屎肠球菌 SFP11C57 19.2 449228951837 14.08 5.12 表皮葡萄球菌 SFP11B20 18.0 449228951799 26.67 8.67 肺炎克雷伯菌 SFP11B24 10.8 449228951779 9.78 1.02 鲍曼不动杆菌 SFP11B4B 20.4 449228951797 12.27 8.13 咽峡炎链球菌 SFP11C7F 24.96 449228951834 28.17 3.21 脑膜炎奈瑟菌 SFNW05CR 25.44 449228951785 23.08 2.36 嗜麦芽窄食单胞菌 SFNW0C6D 23.28 449228951792 16.75 6.53 新型隐球菌 SFNW0C6S 30.99 449228951805 34.07 2.18 阴性对照 SFP1FXGN 5d- 449229278837 5d- 0 微生物鉴定试验 CNAS-GL41:4.5 按优先顺序依次选择标准菌株、质控菌株或其它菌株，试验应覆盖实验室使 用的全部卡片种类和/或方法。 验证要求 CNAS-GL41:4.5 菌株种类的选择：首先参照厂商说明书，覆盖革兰阳性和革兰阴性非苛养菌、苛养菌、 厌氧菌、念珠菌、隐球菌等。包括临床留样菌株和标准/质控菌株。每