实验一--淀粉酶产生菌的分离及酶活性测定.docxVIP

YUNNAN NORMAL UNIVERSITY 本科学生实验报告 学号：3 姓 名: 学院：生命科学学院 专业、班级：12级生物技术班 实验课程名称： 酶工程实验一 教 师： 吴倩 云南师范大学教务处编印 实验一淀粉酶产生菌的分离及酶活性测定 一、目的要求 1、 掌握从土壤中分离酶产生菌的方法，学会应用微生物生态知识分离产酶微生 物。 2、 掌握淀粉酶活性测定的原理，学会淀粉酶活性的测定方法。 二、基本原理 （一）淀粉酶产生菌的分离 1 .菌种的采集 要获得产生某种酶的菌种，可从富含该酶作用底物的场所去采集。 胞外酶的稳定性和最适反应条件通常和菌的最适生长条件一致，因此要筛 选具有某一特性的酶时，只要到相应的环境中采样即可。 富集培养 原理：采集到的样品中如果所需的菌很少，需要先经过富集培养，使所需 的菌大量繁殖，而不需要的菌则不生长或少生长，以利于筛选。 富集的方法：控制培养的温度、pH和营养成分等。 .菌种的分离 淀粉与碘液反应会形成蓝色化合物。 淀粉酶能使淀粉分解为葡萄糖，而葡萄糖与碘反应不会形成蓝色化合物， 结果可使淀粉酶产生菌周围形成透明圈，从而筛选出淀粉酶产生菌。 （二）淀粉酶产生菌的发酵及葡萄糖标准曲线绘制 1 .原理：根据淀粉酶水解淀粉生成还原性糖，还原糖与3, 5 -二硝基水杨酸 共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定的范围内，还原糖的量和反应 液的颜色