实验报告2荧光分光光度法测定维生素b2的含量.docxVIP

【实验题目】 荧光分光光度法测定维生素B?的含量 【实验目的】 1、 掌握标准曲线法定量分析维生素的基本原理。 2、 了解荧光分光光度计的基本原理、结构及性能，掌握其基本操作。 【实验原理】 其结构式为:维生素B2（又叫核黄素，VBJ是橘黄色无臭的针状结晶。 其结构式为: 由于分子中有三个芳香环，具有平面刚性结构，因此 它能够发射荧光。维生素B易溶于水而不溶于乙醒等有机 溶剂，在中性或酸性溶液中稳定，光照易分解，对热稳定。 维生素溶液在430~440nm蓝光的照射下，发出绿色 荧光，荧光峰在535nm附近。维生素B2在pH=6~7的溶 液中荧光强度最大，而且其荧光强度与维生素溶液浓度 呈线性关系，因此可以用荧光光诺法测维生素的含量。 维生素B?在碱性溶液中经光线照射会发生分解而转化为 另一物质一一光黄素，光黄素也是一个能发荧光的物质， 其荧光比维生素压的荧光强得多，故测维生素B2的荧光 时溶液要控制在酸性范围内，且在避光条件下进行。 在稀溶液中，荧光强度F与物质的浓度c有以下关系： 当实验条件一定时，荧光强度与荧光物质的浓度呈线性关系：F=Kc 这是荧光光语法定量分析的依据。 【主要仪器与试剂】 主要仪器：F-2500 HiTachi荧光分光光度计；1cm石英皿；50mL容量瓶；5mL移液管；烧杯; 胶头滴管 试剂：维生素标准溶液：未知液4 【实验内容及步骤】 1、系列标准溶液的