细胞冻存步骤.docVIP

PAGE PAGE 1 一、复苏 1.把冻存管从液氮中取出来，立即投入42℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后(大概1-2分钟) 。 2.把上述细胞悬液吸到恶评EP管或离心管中 ，1200转离心5分钟。 3.把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞完全悬浮 。吸到装有培养基的10cm培养皿或培养瓶中前后左右轻轻摇动，使细胞均匀分布。 4.标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。 5.2或3天换一次培养基。 二、传代 1.培养皿中的细胞生长率达到80%-90%时要传代。 2.把原来的培养基吸掉，加PBS冲洗1到2次，弃掉PBS。 3.加适当的胰