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微生物学实验培养基制备和消毒灭菌;明确培养基配置原理;
掌握配制培养基通常方法和步骤;
了解高压蒸气灭菌基础原理、应用范围及高压蒸气灭菌操作方法;
学习棉塞制作等基础操作技术。; 基础原理:
培养基中含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素, 蛋白胨关键提供氮源和维生素, 而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作为凝固剂, 琼脂在96℃时溶化, 40℃时凝固, 通常不被微生物分解利用。 ;牛肉膏蛋白胨培养基配方;试验器材;操作???骤; 在未调 pH前, 先用 pH试纸测量培养基原始 pH, 假如偏酸, 用滴管向培养基中逐滴加入 lmol/L NaOH, 边加边搅拌, 并随时用 pH试纸测其pH, 直至pH达7.6。反之, 用 lmol/L HCl进行调整。;4.过滤;6.加塞;8.灭菌; 二、马丁氏培养基制备; 马丁氏培养基配方;试验器材;操作步骤; 三、高压蒸气灭菌; 在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时, 灭菌锅内冷空气排除是否完全极为关键, 因为空气膨胀压大于水蒸气膨胀压, 所以, 当水蒸气中含有空气时, 在同一压力下, 含空气蒸气温度低于饱和蒸气温度。;试验器材;操作步骤;4. 用煤气加热, 待冷空气完全排尽后, 关上排气阀。当锅内压力升到所需压力时, 控制热源, 维持压力至所需时间。本试验用0.1Mpa, 121.5℃, 20min灭菌。
5. 灭菌所需时间到后, 关闭煤气, 让灭菌锅内温度自然下降, 当压力表降至“0时, 打开排气阀, 旋松螺栓, 打开盖子, 取出灭菌物品。;每组准备下列物品(灭菌):
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