核酸次专题课件.pptVIP

第七节 核酸的分离和纯化 一、核酸的提取和纯化 （一）DNA的提取和纯化 基因组DNA分离的要点 ●操作要温和，防止DNA断裂 ●不要剧烈震荡 ●不要使用尖头Tip头 ●离心速度要适当 ●DNA回溶比较慢 ●沉淀的DNA为丝状 学习文档 常用的DNA分离方法 ● 盐 / 苯酚 / 氯仿抽提法 ● SDS / 苯酚 / 氯仿抽提法 ● 氯化铯密度梯度离心法 学习文档 （二）RNA的提取和纯化 RNA分离的要点 ● 所有器皿、用具要严格处理，严防 RNase污染－－高温焙烤、DEPC处理 ● 破碎细胞时加入强变性剂（如胍盐）使 RNase失活 ● 在RNA反应体系中加入RNase抑制剂 （如RNasin） 常用的RNA分离方法 ● 酸性胍盐 / 苯酚 / 氯仿抽提法 ● 胍盐 / 氯化铯密度梯度离心法 学习文档 二、核酸的超速离心 密度梯度沉降平衡超速离心法－－ ● 测定核酸的密度 ● 测定DNA中G－C之含量 ● 研究溶液中核酸的构象 ● 用