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标准曲线的绘制(精) 标准曲线的绘制(精) PAGE / NUMPAGES 标准曲线的绘制(精) 综合技术实训指导书 《畜产品检测技术》技术实训指导书 实训项目名称 标准曲线的绘制 学时 4 学时 实训 1.娴熟掌握标准曲线的测定与绘制方法。 目的 2.认识绘制标准曲线的原理和注意事项。 一、标准品吸光度值的测定 分别汲取 0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL 、1.50mL、2.00mL、 2.50mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于 0.0 μ g、1.0 μg、2.0 μg、3.0 μg、4.0 μg、5.0 μg、 7.5 μg、10.0 μg、12.5 μ g亚硝酸钠），置于 50mL 带塞比色管中。分别加入 2mL 4g/L 对氨基苯磺酸溶液， 混匀，静置 3min~5min 后各加入 1mL 2g/L 盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置 15min，用 1cm 比色皿，以零管调理零点，于波长 538nm 处测吸光度，并记录吸光度。 二、标准曲线的绘制 以亚硝酸盐标准溶液的浓度 C 为标准曲线的横坐标 (X) ，以不一样浓度亚硝酸盐标准溶液对应测得的吸光度值 A 为标准曲线的纵坐标 (Y) ，按回归方程式计算结果绘制标准曲线。或当标准溶液的浓度 (X) 取值为 C1、 C2、 Cn 时，对应分光光度计测得的吸光度值分别为 A1 、A2 Yn 。将这些丈量点描述在座标系中，用直尺绘出一条表示 X 与 Y 之间的直线线性关系，这就是常标准曲线。 用作绘制标准曲线的标准物质，它的含量范围应包含试祥中被测物质的含量，标准曲线不可以随意延伸。用作绘制标准曲线的画图纸的横坐标和纵坐标的标度以及实验点的大小均不可以太大或太小，应能近似地反应丈量的精度。 图 1 亚硝酸盐测定标准曲线的绘制 综合技术实训指导书 三、绘制标准曲线的注意事项 1.设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，而且要能涵盖你 所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围以内，包含上限和 下限。 2.最好采纳倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就可以保证标准 样品的浓度不会出现较大的偏离。 3.检测标准样品时，应按浓度递加次序进行，以减少高浓度对低浓度的影响， 提升正确性。 4.标准曲线的标准品数为 9 个点，但起码要保证有 5 个点。 5.做出的标准曲线有关系数因实验要求不一样而有所改动，但一般来说，有关系 数 R 起码要大于 0.99，甚至是 0.999。