《保健食品原料目录 破壁灵芝孢子粉》产品技术要求“多糖的测定”.doc

多糖的测定 2.1试剂和材料 2.1.1硫酸（分析纯） 2.1.2葡萄糖（分析纯） 2.1.3无水乙醇（分析纯） 2.1.4硫酸蒽酮溶液：精密称取蒽酮0.1 g，加硫酸溶液100 mL使溶解，摇匀，置于棕色瓶中即得。 2.2 仪器和设备 2.2.1分析天平（感量0.0001g） 2.2.2分光光度计 2.2.3玻璃回流装置 2.2.4电热恒温水浴锅 2.2.5容量瓶25 mL，50 mL容量瓶 2.2.6各规格移液管 2.2.7具塞试管25 mL 2.2.8滤纸（中速定性滤纸）。 2.3标准曲线的制备 2.3.1对照品溶液的制备 取无水葡萄糖对照品适量，精密称定加水制成每1 mL含0.12 mg的溶液，即得。 2.3.2 标准曲线绘制 精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL，分别置于10 mL的具塞试管中，各加水至2.0 mL，迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6 mL，立即摇匀，放置15 min，立即置冰水浴中冷却15 min，取出，以相应的试剂为空白，在625 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 标准曲线图 2.4供试品溶液的制备 取本品粉末约2 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加水60 mL，静置1h，加热回流4 h，趁热过滤，用少量热水洗涤滤器和滤渣，将滤纸和滤渣置圆底烧瓶中，加水60 mL，加热回流3 h，趁热过滤，合并滤液，置水浴锅上蒸干，残渣用水5 mL溶解，边搅拌边缓慢加入乙醇75 mL，摇匀，在4℃放置12 h，离心，弃去上清液，沉淀物用热水溶解并转移至50 mL，放冷，加水至刻度，摇匀取溶液适量，离心，精密量取上清液3 mL，置25 mL量瓶，加水至刻度，摇匀，即得。 2.5测定 精密量取供试品溶液2 mL，置10 mL具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6 mL”起，同法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的含量，计算即得。 2.6结果计算 式中： W-多糖的含量，%； c-从标准曲线上查的样品的多糖浓度，mg/mL； m-样品质量，mg； 、-表示稀释倍数。 50-水提醇沉后获得的沉淀物经热水溶解定容的体积数值