无菌操作原则及注意事项.pdf

. 无菌操作原则及注意事项 无菌操作原则： 1 、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群 流动，防止尘埃飞扬。治疗室应每天用紫外线消毒一次。 2 、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。 3 、执行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并将手擦干，注意空气和环境清洁。 4 、夹取无菌物品，必须使用无菌持物钳。 无菌操作间 四、进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂、均不可直接接触无菌物品或超过无菌区 取物。 5 、无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内，不可暴露在空气中过久。无菌物与非无 菌物应分别放置。 无菌包一经打开即不能视为绝对无菌， 应尽早使用。 凡已取出的无菌物品 虽未使用也不可再放回无菌容器内。 6 、无菌包应按消毒日期顺序放置在固定的柜橱内，并保持清洁干燥，与非灭菌包分开 放置，并经常检查无菌包或容器是否过期，其中用物是否适量。 7 、无菌盐水及酒精、 新洁尔灭棉球罐每周消毒一次， 容器内敷料如干棉球、 纱布块等， 不可装得过满，以免取用时碰在容器外面被污染。 无菌操作技术及注意事项 1 、玻璃器皿的消毒和清洁 ⑴新购玻璃器皿的处理 新购玻璃器皿应用热肥皂水洗刷，流水冲洗，再用 1% ～2% 盐酸溶液浸泡，以除去游 离碱，再用水冲洗。对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等，经清水洗净后应注入浓盐 酸少许，慢慢转动，使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸，再用水冲洗。 ⑵污染玻璃器皿的处理 ①一般试管或容器可用 3% 煤酚皂溶液或 5% 石炭酸浸泡， 再煮沸 30 分钟， 或在 3% ～ 5% 漂白粉澄清液内 4 小时，有的亦可用肥皂或合成洗涤剂洗刷使尽量产生泡沫，然后用清 水冲洗至无肥皂为止。最后用少量蒸馏水冲洗。 ②细菌培养用的试管和培养皿可先行集中，用 1kg/cm2 高压灭菌 15 ～30 分钟，再用 热水洗涤后，用肥皂洗刷，流水冲洗。 1 / 2 . ③吸管使用后应集中于 3% 煤酚皂溶液中浸泡 24 小时，逐支用流水反复冲洗，再用蒸 馏水冲洗。 ④油蜡沾污的器皿，应单独灭菌洗涤，先将沾有油污的物质弃去，倒置于吸水纸上， 100 ℃烘干半小时， 再用碱水煮沸， 肥皂洗涤， 流水冲洗。 必要时可用二甲苯或汽油去油污。 ⑤染料沾污的器皿，可先用水冲洗，后用清洁或稀盐酸洗脱染料，再用清水冲洗。一 般染色剂呈碱性，所以不宜用肥皂的碱水洗涤。 ⑥玻片可置于 3% 煤酚皂溶液中浸泡， 取出后流水冲洗， 再用肥皂或弱碱性煮沸， 自然 冷却后，流水冲洗。被结核杆菌污染或不易洗净的玻片，可置于清洁液内浸泡后再冲洗。 2 、无菌器材和液体的准备 将玻璃器具中的培养皿、培养瓶、试管、吸管等按上述方法洗净烘干后，用一洁净纸 包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花， 装入干净的铝盒或铁盒中， 于 120 ℃的干燥箱中干燥灭菌 2 小时，取出备用。对于手术器械、瓶塞、工作服以及新配制的 PBS 洗液，则采用高压蒸 气灭菌法，即在 15 磅的条件下，加热 20 分钟。而对于 MEM 培养液、小牛血清和消化液等 需用 G5 或 G6 滤器负压抽滤后使用。 3 、无菌操作过程在无菌操作过程中，最重要的是要保持工作区的无菌、清洁。因此， 在操作前 20 ～ 30 分钟要先启动超净台和紫外灯， 并认真洗手和消毒。 在操作时， 严禁喧哗， 严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的止血钳、镊子等