激光共聚焦(简化版).pptVIP

KCL诱导的细胞外Ca2+内流测量 培养/分离的细胞 ? 20?M Fluo 3-AM负载液30-60min ? 清洗、换液 ? 扫描 KCL 若须快速测量 1.改变扫描速度 2.采用双向扫描 3.减少采样点数(牺牲空间分辨率） 4.采用线扫描(xt) KCL Intensity Before bleach After bleach 90 min after bleach 4. 荧光漂白恢复 (Fluorescence Recover after photobleaching; FRAP) 检测细胞连接间的信息传递 激光扫描共聚焦显微镜原理及应用 来滨 显微镜＋ 各种染色 标记技术 荧光标记技术 优点：1.灵敏度高，比常规免疫组织化学的灵 敏度高1000倍。 2.通过不同颜色荧光标记可以清楚的观 察多种物质的共定位。 3.可以观察活细胞中离子或蛋白的动态 变化 荧光显微镜 激光共聚扫描焦显微镜 双光子激光扫描显微镜 荧光发生的原理 荧光和荧光显微镜 一、荧光的基础术语 荧光物质： 某些物质在特定波长范围内的光线照射下，可发出波长比照