实验五、血清中谷丙转氨酶的测定.pptVIP

血清(xuèqīng)中谷丙转氨酶的测定 实验(shíyàn)五 （2,4-二硝基苯肼法） 第一页，共9页。 一、实验(shíyàn)目的 掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定(cèdìng)的基本原理。 了解血清丙氨酸氨基转移酶的测定(cèdìng)方法及临床意义。 第二页，共9页。 510nm 光吸收法测定 相对血清(xuèqīng)ALT活力 二、实验(shíyàn)原理 丙氨酸氨基转移酶(ALT)催化丙氨酸与α-酮戊二酸生成(shēnɡ chénɡ)丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反应形成相应的2,4-二硝基苯腙，呈黄色，后者在碱性条件下呈红棕色。 （1）丙氨酸+α-酮戊二酸 丙酮酸+谷氨酸 ALT （2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼 丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黄色) 丙酮酸2,4-二硝基苯肼 （3） 苯腙硝醌化合物 NaOH （黄色） （红棕色） 第三页，共9页。 三、实验(shíyàn)器材 材料：人血清 试剂：谷丙转氨酶测定试剂盒 用具(yòngjù)：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅 第四页，共9页。 （1）取3支试管，按下表加入(jiārù)试剂: 试剂 试剂空白管 标准管 样品管 基质液(uL) 200 200 200 标准液