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文档如有侵权，请联系本人协改正删除，内容如有不当之处，请联系本人改正或者删除，谢谢。 文档如有侵权，请联系本人协改正删除，内容如有不当之处，请联系本人改正或者删除，谢谢。 鱼类细胞培养基础知识 一 试验项目介绍 1、试验课时 6课时 2 试验过程: A动物细胞培养液配置 B采取组织培养法培养鱼类细胞 二、试验原理 原代细胞培养是指直接从动物体内获取细胞、组织或器官, 经体外培养后, 直到第一次传代为止。这种培养, 首先用无菌操作方法, 从动物体内取出所需组织(或器官), 经消化, 分散为单个游离细胞, 在人工培养下, 使其不停地生长及繁殖。 细胞培养是一个操作繁琐而又要求十分严谨试验技术。 鱼类细胞组培部分方法: 　　　 （1）组织块固定法 　　　当组织量较少时可采取此法。它是将组织剪成约一立方毫米小块, 按一定百分比将组织块贴在瓶壁上, 最少三十分钟以上, 然后轻轻加人营养液置温箱培养。 （2）机械分散法 　　　此法适适用于细胞间连接较松散组织, 如胚胎组织及幼鱼全鱼。将组织剪成约一立方毫米耐小块, 放入底部有一铜网注射器内, 用手压力将组织挤出网孔, 最终将分散组织吹打后加人营养液分装培养。 （3）络合剂分散法 　　　现在使用络合剂关键是乙二胺四乙酸, 它能与细胞间钙离子、镁离子结合而使细胞连接松散, 经吹打即可分散。该法现在关键用于囊胚细胞培养及上皮型细胞系传代。