检测新型冠状病毒2019-nCoV的引物探针组合发明专利.pdfVIP

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2021-10-30 发布于浙江
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检测新型冠状病毒2019-nCoV的引物探针组合发明专利.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112662810 A (43)申请公布日 2021.04.16 (21)申请号 202011510185.2 (22)申请日 2020.12.18 (71)申请人郑州安图生物工程股份有限公司地址 450000 河南省郑州市经济技术开发区经北一路87号 (72)发明人高歌　高利飞　李宁　王玮　李振红　付光宇　 (74)专利代理机构北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人温可睿 (51)Int.Cl. C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/6851 (2018.01) C12N 15/11 (2006.01) C12R 1/93 (2006.01) 权利要求书2页说明书9页序列表3页 (54)发明名称检测新型冠状病毒2019-nCoV的引物探针组合 (57)摘要本发明涉及生物技术领域，尤其涉及检测新型冠状病毒2019‑nCoV的引物探针组合。本发明提供的引物探针组合中，包括针对新型冠状病毒 2019‑nCoV的ORF1ab基因、N基因引物、探针。该引物和探针具有良好的特异性，结合real time PCR检测方法，能够实现对2019‑nCoV的快速、准确、灵敏的鉴定。实验表明，本发明的引物探针的检测新型冠状病毒2019‑nCoV的ORF1ab基因、N基因最低检测限均为100copies/ml。 A 0 1 8 2 6 6 2 1 1 N C CN 112662810 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.检测新型冠状病毒ORF1ab基因的引物探针组合，其中：引物对序列如SEQ ID NO:1～2所示；探针序列如SEQ ID NO:3所示。 2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述探针的5’端连接FAM荧光基团，3’端连接淬灭基团BHQ1。 3.检测新型冠状病毒N基因的引物探针组合，其中：引物对序列如SEQ ID NO:4～5所示；探针序列如SEQ ID NO:6所示。 4.根据权利要求3所述的引物探针组合，其特征在于，所述探针的5’端连接ROX荧光基团，3’端连接淬灭基团BHQ1。 5.检测新型冠状病毒的试剂盒，其包括：权利要求1或2所述的检测新型冠状病毒ORF1ab基因的引物探针组合，和权利要求3或4所述的检测新型冠状病毒N基因的引物探针组合。 6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括：如SEQ ID NO.9～10所示的内标扩增引物对；如SEQ ID NO.11所示的内标探针；所述内标探针的5’端连接HEX荧光基团，3’端连接淬灭基团BHQ2。 7.根据权利要求5或6所述的试剂盒，其特征在于，还包括Real time PCR反应试剂；所述Real time PCR反应试剂包括：dNTPs、MLV酶、Taq酶、MgCl ； 2 其中，dNTPs的浓度为10mM、MLV酶的浓度为200u/μL、Taq酶的浓度为5u/μL、MgCl 的浓度