水稻花药培养及其应用.docxVIP

水稻花药培养及其应用 水稻花药培养及其应用 大田农艺《现代农业科技》２００８年第１７期 水稻花药培养及其应用 （江西省萍乡市农业科学研究所，江西萍乡３３７０００） 摘要概述水稻花药培养的基础理论研究以及水稻花药培养在杂交水稻育种方面的应用，并提出了存在的问题，同时展望花药培养 与转基因工程相结合成为杂交水稻育种的新方向。 关键词水稻；花药培养；理论研究；应用 文献标识码Ａ文章编号１００７－５７３９（２００８）１７－０２３４－０１中图分类号Ｓ５１１．０３５．３ １９６８年新关宏夫等首先通过花药培养诱导小孢子再生 这些单倍体植株可自发植株成功，培养出单倍体花粉植株。 或人工加倍形成正常的二倍体植株。加倍形成的二倍体是纯合体，其性状稳定，不会发生分离［１］。在这期间，花药培养为水稻的育种工作做出了重大的贡献，是水稻的一个非常重要和实用的育种手段。 关，其中最高的能达到对照的５．１倍。而且，多种激素成分的培养基比单一激素成分的花药培养效果要好。在培养基中加入蔗糖和麦芽糖（３％蔗糖＋３％麦芽糖）对出愈率及培养力氮源现在一般都用硝态氮，因为高浓度的改善效果更佳［５］。 的氨态氮会明显抑制愈伤组织的形成。朱永生等指出，ＮＨ４＋ ／ＮＯ３－为５．３／２８．０对提高籼粳杂交后代花药培养力的效果 最好［５］。在培养基中添加有机物，如马铃薯提取液、丝瓜伤流液、椰子汁等对提高愈伤组织诱导率和绿苗分化率具有明显效果。 水稻花药培养理论研究取材 早期的水稻花药培养常用Ｆ１代的材料，由于选材盲目 性大，培育出的植株中有利用价值的较少。所以现在取材，一般是选用Ｆ３或Ｆ４代材料进行花培［２］。取材的时间最好选在晴天的下午，选取剑叶与下一叶的叶距５￣１０ｃｍ的带苞叶稻穗，此时幼穗的颖壳宽度已接近成熟的大小，颖壳呈现淡绿色，雄蕊伸长达颖壳的１／３￣１／２，花药发育处于单核中晚期［３］。 ２水稻花药培养的实际应用 在过去４０年的时间，花药培养在水稻研究中得到广泛 的应用。不育系和恢复系由于长时间的使用会发生不同程度的退化，因此严格的提纯复壮措施非常必要。花培育种在不育系和恢复系的提纯上应用较多。葛美芬等［６］配套提珍汕９７Ａ和恢复系明纯了汕优６３的三系材料珍汕９７Ｂ、 恢６３。１９９３年张家宏等［７］对水稻印尼水田谷６号质源不花培过程产育系Ⅱ－３２Ａ和优ⅠＡ的花培提纯获得成功。 生的变异为水稻的选育提供了新的遗传基础材料，选育出了一些应用广泛的新恢复系和新的组合。如四川农业大学水稻研究所选育出的恢复系花广５１８、花广５４９、花广１３５７和蜀恢１６２等广亲和恢复系。张志雄等［８］利用花培技术选育出了恢复系川恢８０２和组合Ⅱ优８０２。另外，由于水稻籼粳杂种和爪籼杂种的后代稳定非常慢，可以对其杂种后代进行花药培养，加速其杂种后代的稳定，以加速水稻育种的进程。利用花培技术已选育出了具有良好育性转换特性的光温敏不育系Ｉ－ＩＳ－１、Ｉ－ＩＳ－２、１１０３Ｓ、Ｈ１２８６Ｓ、１６４７Ｓ、在常规育种中也利用花培技术育ＺＮＤＢＳ和培ＭＳ－１等［９］。 出了很多优良的常规品种，如中花８号、中花１０号、中花１２号、中花１３号、中花１４号、单丰１号等，还有高抗寒的龙粳 １．２低温预处理 由于水稻的花药培养，从接种到孢子体途径分裂的启 动，期间有几天的发育停滞期，经过低温预处理后便可消除这段停滞期。预处理还可延缓花药的退化，为启动花粉雄核发育所需生化变化的进行赢得时间。将材料置于９￣１０℃的冰箱中，预处理８ｄ（籼稻）或１０￣１５ｄ（粳稻和籼粳杂交组合）。 １．３基本培养基 继最初使用Ｍｉｌｌｅｒ培养基进行花培成功后，通过大量 试验及比较，迄今已获得适合各种不同水稻花培材料的培养基。如通用和Ｍ８培养基对各种类型材料具有普遍适用性，Ｎ６比较适合粳稻材料，合５适用籼稻类型的材料，ＳＫ３适用于籼粳杂种后代。ＭＳ培养基是用在分化阶段的培养基。而在实际应用中我们要针对不同的基因型材料对培养基进行调整，以达到最佳的培养效果。 １．４激素、碳源、氮源和有机物 培养基中的激素、碳源、氮源和有机物对花药培养有较 水稻花药培养中存在的问题及展望 虽然水稻花药培养的技术已逐日完善，但也存在许多技术难题和理论问题。其中最主要的问题是花药培养得苗率（出愈率×绿苗率）低，尤其是籼稻的花药培养得苗率更低，籼稻花培的得苗率只有１．０％￣１．５％。为了提高籼稻花培绿苗率，梅传生等［１０］，研制了一种提高绿苗率的新培养基Ｍ８。经试验证明Ｍ８确实大大提高了籼稻的绿苗