枯草芽孢杆菌感受态细胞制备和转化.docVIP

枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备和转化 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备和转化 PAGE / NUMPAGES 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备和转化 精心整理 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备和转化 采用改进的 Spizizen法进行，详述如下： A，试剂 SPI-ASaltsSolution： 0.4% 硫酸铵（ NH 4）2SO4132 2.8%K 2HPO 4·3H2O228 1.2%KH 2PO4136 0.2%TrisodiumCitrateDihydrate （柠檬酸三钠 -2-水）即二水合柠檬酸三钠 210 121°20min 灭菌（每次用完要灭菌） SPI-BSaltsSolution：0.04%MgSO 4* 7H2O120 121°20min 灭菌（每次用完要灭菌） 100×CAYEsolution:2%Casaminoacid（酪蛋白水解物） 10%YeastExtract 121° 20min 灭菌（灭菌一次，每次在超净台取样） 100×EGTAsolution：10mMol/LEGTA(NaOH 调 pH 至 8.0) SPIMedium （ 20ml ） SPIIMedium （ 6ml） 9.8mlSPI-ASaltsSolution 5.88mlSPIMedium 9.8mlSPI-BSaltsSolution 60ul50mMCaCl2 200ul50%Glu