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② 枸橼酸盐血浆分离血清法 以 10 %枸橼酸钠液为抗凝剂( 3.5% )采血; 静置分层; 按 1000mL 血浆加入 30%CaCl 2 1.3mL ,混匀 后静置 48h ,去除纤维制成血清。 第十章 免疫血清制备技术 第三十一页,共51页 5 、质量检验 ① 物理性状检验 按成品检验的有关规定进行 ② 无菌检验 按各种抗血清规定方法、标准进行 ③ 效力检验 ④ 安全检验 常用: 18 - 22g 健康小鼠 2 只 , 各皮下注射血清 0.5mL 250 - 450g 健康豚鼠 2 只 , 各皮下注射血清 10mL 观察 10d 均应健活 第十章 免疫血清制备技术 第三十二页,共51页 二、类毒素及抗毒素的制备 某些病原微生物能产生强有力的特殊毒性 物质,从而大大增强病原的毒害作用,这种 毒性物质就称为 毒素 。 第十章 免疫血清制备技术 第三十三页,共51页 是微生物在生命活动过程 外毒素 中产生并释放或分泌到周 围环境中的毒素。 毒素 只有在微生物死亡后细胞 内毒素 破裂时,才能释放出来的 毒素。 第十章 免疫血清制备技术 第三十四页,共51页 类毒素 外毒素经适量浓度的甲醛处理后,可去除 其毒性,保持其抗原性;这种丧失了毒性而 仍具有抗原性的外毒素,称为 类毒素 。 也称为 “ 变性毒素 ” 第十章 免疫血清制备技术 第三十五页,共51页 抗毒素 以类毒素作为抗原免疫动物,刺激机体相应 的 B 细胞活化增殖为浆细胞后,产生的特异性 抗体,称为 抗毒素 。 抗毒素可特异性识别侵入机体的外毒素 并中和其毒性,以保护机体免受毒害 第十章 免疫血清制备技术 第三十六页,共51页 第一页,共51页 什么是免疫血清 ? 动物在接受抗原刺激或自然感染康复后,其 血清中通常含有针对特定抗原的高效价特异性 抗体,该动物的血清即称为 免疫血清 。 又称为 高免血清、抗病血清 。 第十章 免疫血清制备技术 第二页,共51页 抗细菌血清 主要包括 抗病毒血清 抗毒素血清 第十章 免疫血清制备技术 第三页,共51页 是用于人工被动免疫的制剂 1. 动物感染病原后,使用免疫血清,就等于 直接给动物输入抗体,可以迅速中和病原 或毒素,发挥良好的治疗作用。 第十章 免疫血清制备技术 第四页,共51页 2. 免疫血清也可用于疾病的预防,提供短期的 被动免疫。 3. 特异性免疫血清还可用于疫病诊断和微生物 鉴定。 第十章 免疫血清制备技术 第五页,共51页 一、免疫血清的制备过程 通常是给适当动物以多次注射特定病原微生物 或其代谢产物等抗原物质,刺激动物发生免疫应 答,在血清中产生大量的特异性抗体。 第十章 免疫血清制备技术 第六页,共51页 1 、动物的选择 既可用同种动物,也可用异种动物! 以抗病毒血清居多 用同种动物制造的血清 同源抗病血清 抗菌性和 用异种动物制造的血清 异源抗病血清 抗毒素血清为主 常选择 大动物 → 主要是考虑 出血量 问题。 第十章 免疫血清制备技术 第七页,共51页 ( 1 )许多免疫血清是用马制备的! 优点 不受接种途径、抗原量限制; 饲养管理也比较方便; 采血便利;产血清量多。 第十章 免疫血清制备技术 第八页,共51页 马匹的选择 ① 年轻: 3~8 岁 ② 健康:来自非疫区 1、就地进行常规检疫后运回隔离饲养、观察 2、然后根据不同生产目的进行系统检疫 ( 马鼻疽、 马传染性贫血、马流产等 ) ,优选出的马匹经 消毒后转入专用饲养舍饲养、生产。 第十章 免疫血清制备技术 第九页,共51页 ( 2 )也可用健壮 阉牛 制造 1、饲养管理简便; 2、多选择 3 ~ 10 岁的黄牛,并应隔离观察检疫 ( 结核、牛肺疫、布病等 ) ,证明完全健康后 方可用于生产; 3、但血清渗出率偏低。 多用于抗气肿疽、抗猪丹毒、抗猪牛出败、 抗牛瘟等血清的制备。 第十章 免疫血清制备技术 第十页,共51页 ( 3 ) 猪 1、应选择体壮、健康者; 2、放血提取血清,不作循环采取血清方法; 3、主要用于抗猪瘟血清生产。 第十章 免疫血清制备技术 第十一页,共51页 ( 4 ) 羊 、 兔 、 鸡 等 1、常用于制备诊断用高免血清; 2、较少用于抗病血清生产。 第十章 免疫血清制备技术 第十二页,共51页 2 、抗原的准备 抗原是制备免疫血清的基础 优良的菌 / 毒种则是制备优良抗原的关键 第十章 免疫血清制备技术 第十三页,共51页 优良菌 / 毒种的生物学特征应十分典型 (形态、培
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