一种新型冠状病毒2019-nCoV抗体谱检测试剂盒发明专利.docxVIP

PAGE 3 一种新型冠状病毒2019-nCoV抗体谱检测试剂盒 技术领域 本发明涉及一种新型冠状病毒2019-nCoV抗体谱检测试剂盒，属于新型冠状病毒2019-nCoV检测技术领域。 背景技术 免疫印迹法(Western blotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，用于组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。 传统免疫印迹法分三个阶段进行。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)：抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷，在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向原理阳极泳动，分子量越小，泳动速度就越快。此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带)。第二阶段为电转移：将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素膜上，选用低电压和大电流，通电45min转移即可完成。此阶段分离的蛋白质条带肉眼仍不可见。第三阶段为酶免疫定位：将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜(相当于包被了抗原的固相载体)依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后，加入能形成不溶性显色物的酶反应底物，使区带染色。常用的HRP 底物为3,3-二氨基联苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈蓝紫色)。阳性反应的条带清晰可辨，并可根据SDS时加入的分子量标准，确定各组分的分子量