gfp基因的克隆与表达.pdfVIP

基因工程实验设计 题目：绿色荧光蛋白基因 (gfp) 的克隆及表达 专业：生工 1001 姓名：刘会淼 2013 年 3 月 13 实验目的：研究绿色荧光蛋白（ Greed Fluorescent Protein ，GFP）基因的基因克隆及在大肠 杆菌中的表达。 实验方法 ; 通过分别将 DH-5 α(pEGFP-N3)和 DH-5 α(pET-28a)提取质粒、酶切并连接形成重组 质粒 pET-28a-GFP，将重组质粒导入 DH-5 α感受态细胞中进行转化 ,通过限制性核酸内切酶 Not I 与 Bam H1 和 PCR 对所建质粒进行分析鉴定后 , 通过转化的方法把含绿色荧光蛋白 （GFP）外源基因转入大肠杆菌体 BL-21 内进行表达， 再用 IPTG诱导 GFP基因表达，如果可 以看到显现绿色，判断 GFP基因在大肠杆菌中成功表达。 1. 材料与方法： 1.1