大四课件上免疫实验课血凝.pptxVIP

实验十四血小板计数【目的】掌握血小板的显微镜计数方法。【原理】血液经一定比例稀释和破坏红细胞后，滴入计数板，在显微镜下计数一定范围内的血小板数量，经换算求出每升血液中血小板的数量。【器材】1.试管、试管架2.吸管、吸耳球3.微量吸管、胶吸头、干脱脂棉玻棒计数板、盖玻片、绸布【试剂】草酸铵稀释液草酸铵：溶血EDTA－Na2：抗凝、防Plat聚集【标本】 EDTA－K2抗凝静脉血或末梢血。【操作】1. 加稀释液：0.38ml2. 取外周血：20ul3. 稀释血液：擦净→插入→打出→冲洗→混匀→静置10min 4. 充液：擦净→盖上→混匀→充入→静置10-15min5. 计数 放大倍数：高倍（×40） 范围：中央大方格内四角及中央共五个中方格 顺序、压线细胞计数原则：同WBC6. 计算：PLT/L=N×5×10×20×106/L =N×109/L 7. 报告：PLT/L=△△△ ×109/L未溶解RBC镜下Plat待征：无色，柔和折光性的圆、椭圆小体，针尖大小放大400倍血小板WBC白细胞未溶解红细胞放大200倍：血小板【注意事项】1.穿刺深度（2～3）mm,吸血及注入稀释液动作应快2.静置15min，Plat完全下沉后计数3.所用器材清洁、无灰尘及斑点4.计数时用暗光，注意与杂质区别：Plat：圆、椭圆，柔和折光，（1/3～1/5）RBC；杂质：形态、大小、折光性不一致5.采血后1小时