化学致癌作用及其评价 .pptVIP

第六十二页，共102页 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 2.凋亡敏感性降低 凋亡敏感性降低在人细胞转化中起重要作用。 常用细胞凋亡的检测方法： 常规的琼脂糖凝胶电泳 流式细胞仪检测细胞凋亡（Annexin V/PI双染法） 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL法） 第六十三页，共102页 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 3.锚着独立性生长 转化细胞对血清及细胞间通讯的依赖性降低，具有在低密度条件下在半固体琼脂中形成集落的能力，即锚着独立性生长，它是癌前转化的特征，是体外检测细胞恶性转化的重要指标。但并不能反映其裸鼠成瘤性。 第六十四页，共102页 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 4.血清抗性试验 血清作为上皮细胞的一种终末分化诱导剂，高浓度时可抑制人类上皮细胞生长及诱导肿瘤细胞分化，恶性转化细胞对血清的生长抑制作用具有抗性。 第六十五页，共102页 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 5.刀豆蛋白A凝集试验 ConA凝集试验：恶性细胞膜表面的ConA受体增加，在ConA溶液中将出现凝集时间提前和凝集度加强现象。 第六十六页，共102页 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 6.动物体内成瘤性 判定细胞发生恶性转化的最终最可靠