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第二节 柠檬酸?;
柠檬酸(citric acid)
学名:2-羟基-丙烷三羧酸或 ?-羟基丙三酸
分子式C6H8O7 ,分子量192.13
商品柠檬酸有:
Anhydous citric acid 36.6 结晶析出
Monohydrate citric acid 36.6 结晶析出
;一、历史
1893年前,主要从柑橘、菠萝和柠檬等提取。
1893年后发现微生物(青霉)可产生柠檬酸。
1913年,利用黑曲霉生产柠檬酸。
1917年,美国采用表面培养法生产柠檬酸。
1923年,美国建立第一家固体发酵生产厂家。
1951年,美国率先用深层发酵法生产柠檬酸。
我国60年代末开始浅盘发酵生产柠檬酸。
1968年,上海酵母厂深层发酵生产柠檬酸投产。;二、柠檬酸生产菌
青霉(Penicillium)、毛霉(Mucor)、曲霉(Aspergillus)等。
国内外学者一致认为:
黑曲霉(Aspergillus niger)是生产柠檬酸的最佳菌种。因为:
黑曲霉具有多种较强的酶系,边长菌、边糖化、边发酵产酸。
; 三、柠檬酸发酵机制及代谢调控
1. 柠檬酸生物合成途径
EMP 乙酰CoA
葡萄糖 丙酮酸 柠檬酸
HMP 草酰乙酸
; TCA循环与柠檬酸的形成;;三高三低:
高底物浓度:
激活磷酸果糖激酶
高铵离子浓度:
阻遏?-酮戊二酸脱氢酶
高通氧强度:存在一条侧系呼吸链,
正常情况下,不产生ATP。
缺氧导致不可逆失活,NADPH2改走标准呼吸链,产生ATP。;低磷酸盐浓度:否则ATP多。
低Mn2+浓度:
降低菌体中糖代谢转向合成蛋白质、核酸的能力,造成NH4+浓度升高。
低pH值:有利于柠檬酸积累。;四、柠檬酸的生产工艺
黑曲霉(Aspergillus niger)利用淀粉质原料大量积累柠檬酸。
工艺: 固体或液体深层发酵
原料:薯干粉、废糖蜜、甘蔗渣等; 柠檬酸发酵工艺;1. 原料预处理
淀粉的液化、糖蜜的除杂
我国采用薯干粉发酵工艺只用液化工艺,利用黑曲霉自身能产生糖化酶,完成后续的糖化工艺。
液化法是我国柠檬酸工艺的特色方法。; 深层发酵的几种方法
利用薯干粉醪液
利???糖蜜
利用淀粉水解糖;2.培养基与发酵条件
提供高浓度的葡萄糖和充足的氧,而磷、锰、铁、锌等无机盐处于低水平。
接种方式:二级种子,麸曲孢子;(1)碳源:高糖是柠檬酸发酵的一大特征。
(2)氮源:偏好无机氮。添加铵盐。
(3)温度:28 ? 30°C
初期温度稍高,有利于菌体繁殖
产酸期后温度稍低,有利于产酸
(4)pH:低 pH(2.0 ? 3.0)条件下产生柠檬酸
中性 pH 条件下形成草酸
菌体生长发育pH 3.0 ? 7.0
(5)溶解氧的控制:严格好氧微生物,提高发酵罐
内溶氧水平可提高柠檬酸产量。;五、柠檬酸的提取
国内常用的方法:钙盐法
1.发酵醪预处理:直接加热
作用:
(1)杀死微生物
(2)使蛋白质变性凝固,粘度降低,利于过滤。
(3)使菌体内柠檬酸释放出来,提高产率。;2. 过滤:板框压滤机
3. 中和:柠檬酸+钙盐 柠檬酸钙沉淀
4. 酸解:柠檬酸钙+H2SO4 柠檬酸+CaSO4
5. 浓缩:减压蒸发
6. 结晶:介稳区投晶种
7. 干燥:热空气干燥法; 其它几种提取方法
离子交换
电渗析
萃取法;第三节 苹果酸;DL-苹果酸:
白色或结晶状粉末,国外采用化学法生产。
L-苹果酸:
无色结晶,存在于植物或其果实中,发酵法生产。
;;三、生产方法
1. 从果汁中直接抽提法:经济上不合理
2. 化学合成法:产物是DL-苹果酸
3. 发酵法:
(1)一步法 糖类 苹果酸
(2)二步法
根霉 酵母菌、细菌
糖类
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