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DNS 法测还原糖和总糖 一、配制试剂 1mg/mL 葡萄糖标准液 预先将分析纯葡萄糖置于 80℃烘箱内约 12 小时，至恒重。准确称取 500mg 葡萄糖置于烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到500mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至500mL ，混匀，4℃冰箱中保存备用。若该溶液发生混浊和出现絮状物现象，则应弃之，重新配制。 3,5-二硝基水杨酸试剂（DNS 试剂） 将 5.0g 3,5二-硝基水杨酸溶于200ml 2mol/L氢氧化钠溶液中 (注意:在加入氢氧化钠过程中, 不适宜用高温促溶，溶液温度不要超过48℃)，接着加入500mL 含 130g 酒石酸钾钠的溶液，混匀。再加入5g 苯酚和 5g 无水亚硫酸钠，搅拌溶解后，定容至 1000ml。储存在棕色瓶中，避光暗处保存备用。（室温下存放 7 天后可以使用,有效期为 6 个月） 二、绘制标准曲线 将 1mg/mL 葡萄糖标准液制成浓度为 0.5g/L的葡萄糖标准液，分别取标准溶液 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL， 补水至 1mL ，加入DNS 1.5 mL，沸水浴显色 5 分钟，冷却后补水至10 mL，550nm 处测定吸光值，浓度 —吸光值作标准曲线，用 1.0mL 蒸馏水做空白对照。三、还原糖测定 取稀释到适当浓度的发酵液 1.0mL，加入 DNS 1.5 mL，沸水浴显色 5 分钟，冷却后补水至 10 mL，5