分子发光分析PPT课件.ppt

* 3、荧光分析法的应用 方法 直接荧光法 被测物本身有荧光 被测物与试剂反应后 F与物质的 浓度成正比 荧光猝灭法 被测物使荧光熄灭 由荧光强度降低的强度来测定被测物的含量 间接荧光法 某些阴离子夺取金属络合物中金属 离子，而释放出能发荧光的配位体 催化荧光法 反应速度慢，荧光微弱，难测定 金属离子将加速反应进行 * 磷光分析法 1．如何获得较强的磷光 增加试样的刚性: 低温冷冻 固体磷光法： 吸附于固相载体（滤纸） 分子缔合物的形成： 加入表面活性剂等 重原子效应： 加入含重原子的物质，如银盐等 敏化磷光： 通过能量转移产生磷光 磷光发射：电子由第一激发三重态的最低振动能级 →基态， T1 → S0跃迁； 电子由S0进入T1的可能过程：（ S0 → T1禁阻跃迁） * 荧光计上配上磷光测量附件即可对磷光进行测量。 在有荧光发射的同时测量磷光 磷光分析仪器 应用 * 化学发光分析法 一、基本原理 A +B → C + D* D* → D + h? 某些化合物接受能量而被激发，从激发态返回基态时， 发射出一定波长的光 （1）能够发光的化合物大多为有机化合物，芳香族化合物 （2）发光反应多为氧化还原反应，激发能与反应能相当 ?E=170～300 kJ/mol；位于可见光区 （3）发光持续时间较长，反应持续进行 发光反应如果存在于生物体(萤火虫)中，称生物发光 * 光谱分析 原子光谱 原子吸收 原子发射 原子荧光 分子光谱 分子吸收 紫外-可见光谱 红外光谱 分子发光 * 第二章 分子发光分析 分子 吸收能量 激发为激发态 释放出能量 基态 电能 化学能 光能 称为“发光” 光的形式释放 荧光 磷光 分子发光 光致发光 化学发光 辐射跃迁 非辐射跃迁 以热的形式释放 * 分子荧光分析法 一、基本原理 （一）荧光和磷光的产生 ? 从分子结构理论来讨论 分子中电子 的能量状态 电子所处的能级 振动能级 转动能级 电子的多重态 J=2S+1 S：为各电子自旋量子 数的代数和 S=0, J=1 单重态S表示 （所有电子都是自旋配对的） S=1, J=3 三重态 T表示 大多数基态分子都处于单重态 电子在跃迁过程中伴随着 自旋方向的变化（自旋平行） * 基态单重态S 激发态单重态S 激发态三重态T 激发单重态S与激发三重态T的不同点： ⑴ S是抗磁分子，T是顺磁分子 ⑵ tS = 10-8s, tT = 10-4～1s；(发光速度很慢) ⑶ 基态单重态到激发单重态的激发为允许跃迁， 基态单重态到激发三重态的激发为禁阻跃迁； ⑷ 激发三重态的能量较激发单重态的能量低 * 其中S0、S1和S2分别表示分子的基态、第一和第二电子激发的单重态 T1和T2则分别表示分子的第一和第二电子激发的三重态。 V=0、1、2、3、…表示基态和激发态的振动能级。  2．分子内的光物理过程 * S0 S1 S2 T1 吸光?1 吸光?2 振动弛豫: 在同一电子能级中，电子由高振动能级转至低振动能级，而将多余的能量以热 的形式发出。发生振动弛豫的时间为10-12s数量级。 非辐射能量传递过程； * S0 S1 S2 T1 吸光?1 吸光?2 内转移: 当两个电子能级非常靠近以至其振动能级有重 叠时， 常发生电子由高能级以无辐射跃迁方式转移至低能级。（S1 转移 S2） * S0 S1 S2 T1 吸光?1 吸光?2 荧光?3 系间窜跃: 指不同多重态间的无辐射跃迁， 例如S1→T1就是一种系间窜跃。 通常，发生系间窜跃时，电子由S1的较低振动能级转移至T1的较高振动能级处。 * 辐射能量传递过程 荧光发射: 电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态 S0 S1 S2 T1 吸光?1 吸光?2 荧光?3 荧光 得到最大波长为λ3的荧光 由图可见，发射荧光的能量比分子吸收的能量小 λ3 λ2 λ1 * 磷光发射: 电子由基态单重态激发至第一激发三重态的几率很小，因为这是禁阻跃迁。 但是，由第一激发单重态的最低振动能级，有可能以系间窜跃方式转至第一激发三重态，再经过振动驰豫，转至其最低振动能级，由此激发态跃回至基态时，便发射磷光， 这个跃迁过程（T1→S0）也是自旋禁阻的，其发光速率较慢，约为10-4-10s。因此，这种跃迁所发射的光，在光照停止后，仍可持续一段时间。 S0 S1 S2 T1 吸光?1 吸光?2 荧光?3 磷光 磷光 * 外转移 指激发分子与溶剂分子或其它溶质分子 的相互作用及能量转移，使荧光或磷光强 度减弱甚至消失