动物细胞培养和核移植技术上课用.ppt

 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术;教学目标;重点 动物细胞培养的过程及条件。 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 难点 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 ; 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？;动物细胞工程：; ; 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 ;动物细胞培养的过程:;动物胚胎或幼龄动物的组织、器官;;;无菌操作;;;（1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据;2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？;细胞的全能性; ;;克隆动物的方法和植物的组织培养一样吗？;卵细胞;;供体细胞（供核）;胚胎细胞核移植相对与体细胞核移植的区别： 胚胎细胞核的分化程度更低，全能性更高，体细胞核移植分化成完整个体的潜能就低，而胚胎核几乎未分化，成功的可能性就大的多 ;动物体细胞核移植难度既然大与胚胎细胞核移植,那为什么还用细胞核移植？ ;2.体细胞核移植技术的应用前景;克隆动物的研究意义;成功率低；许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷；克隆动物食品的安全性问题。;知识结构; 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（　） 　 A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞;1.动物细胞培养要经过脱分化吗？为什么？ 不经过。 因为动物细胞培养，只是为了培养出来大量的细胞，而不是把它培养成器官或生物个体。 动物细胞培养，只是需要它在体外不断地进行分裂就可以了。不需要让它脱分化和再分化。 2.体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是： 因为 全部的DNA 不止是存在于细胞核中的 比如线粒体中也还是有的 ;教学参考; 4.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 血清中含有蛋白质、氨基酸、??萄糖、激素等，其中蛋白质为白蛋白和球蛋白；氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，有些动物细胞不能合成，必须由培养液提供；激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、增殖、贴附。因此，细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖，一般要添加10%----20%的血清。 5.无血清培养：在科学研究中，有时需要明确界定培养液的成分，而血清中由于含有许多未知成分，会对研究结果有影响，因此，在进行细胞培养时，也可采用无血清培养。无血清培养基是在基本培养基中，添加一些已知的促进细胞生长和增殖的物质。 6.去核方法：目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法。还有人采用其他方法，如梯度离心、紫外光短时间照射、化学物质处理等。这些方法是在没有刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除细胞核或使卵细胞核DNA变性，从而达到去核目的。;再见