演讲课件E玫瑰花环形成实验.pptVIP

* E玫瑰花环形成实验 中山医学院免疫教研室 2012-04 E Rosette Forming Cell Test 掌握E花环形成的原理 熟悉E花环形成实验的步骤及光镜下E 花环的形态 熟悉磁珠分离的原理 实验目的 T细胞的表面分子是T细胞与其它细胞和分子间相互识别及作用的物质基础。它们在T细胞活化、增殖和分化等过程中起重要作用。 TCR-CD3复合物参与T细胞的抗原识别和信号转导； CD2、CD28、CTLA-4、CD45、CD40L 等膜蛋白参与T细胞活化及T细胞与其它细胞间相互作用。 CD4/CD8分子辅助TCR识别结合抗原，参与信号转导；根据CD4和CD8分子的表达将其分为CD4+T和CD8+T细胞。 T细胞 CD2 CD3 TCR CD8 密度梯度离心法 CD4 T细胞表面分子 磁珠分离策略： 一. 阳性分选 磁珠标记目的细胞 未标记细胞先行流出 移出磁场后收集目的细胞 CD4+T细胞 分离柱 CD4-T细胞 磁珠标记非目的细胞 目的细胞先行流出 二. 阴性分选 成熟的人T细胞表面表达绵羊红细胞（SRBC）受体（即CD2分子），能与SRBC结合形成玫瑰花环样结构，可在光学显微镜下观察计数。本法可用于分离外周血T细胞及检测T细胞的数量和比例。 E花环分离法原理 * T T B SRBC CD