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- 2021-11-14 发布于广东
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细菌转化实验原理和操作步骤
转化 ( transformation )是指一段同源或异源的 DNA 转入受体细胞并得到表达的水平基因
的转移过程,是现代分子生物学研究和基因工程不可缺少的重要技术。
关键词: 细菌转化细菌转化
一.实验目的
1 .以 pGLO 质粒转化大肠杆菌为例,学习转化的基本原理及方法。
2 .验证 DNA 是遗传物质,加深对中心法则的理解。
二.实验原理
转化 ( transformation )是指一段同源或异源的 DNA 转入受体细胞并得到表达的水平基因
的转移过程, 是现代分子生物学研究和基因工程不可缺少的重要技术。 目前常用的转化方法
有 CaCl 2 法 ( 化学转化法 ) 和电转化法。 本实验是用 pGLO 细菌转化试剂盒中提供的 pGLO
质粒来转化大肠杆菌,所用方法为 CaCl 2 转化法。
pGLO 质粒:
pGLO 质粒上主要含有两个基因,一个为编码绿色荧光蛋白 (GFP) 的基因,一个为抗生素氨
苄青霉素抗性基因。 此外, 该质粒还整合有一个特殊的参与受体细胞中绿色荧光蛋
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