wnt信号通路专题知识.ppt

WNT信号通路专题知识;Wnt信号通路;Wnt路径发觉; 1996年, Wnt路径关键组员被相继确定和克隆。研究发觉, 这一信号路径关键包含三个步骤, 即由Wnt配体与胞膜受体特异性结合, 引发胞内一系列级联反应, 进而调整核内基因表示。传统信号路径系统见解认为, 信号是从细胞表面到细胞核线性传输。Wnt信号路径起点为胞膜, 由分泌性信号蛋白Wnt, 经过跨膜受体蛋白, 经由多个细胞内蛋白将信号传至细胞核内。这点上看, 它是一个与传统见解相一致信号路径系统。然而很多研究发觉, Wnt路径和其她细胞功效、信号传输过程相互交叉, 不是直线型结构, 而是一个网络调整模式, 含有多个关键调控点。;Wnt路径总框架; Wnt信号路径 ;Wnt路径组成和实现;胞内信号传输;靶基因; 在正常生长成熟机体中, 细胞生长、增殖和分化等含有一定规律性和有序性。有限生长细胞在没有Wnt信号时, Wnt通路呈关闭状态。但当Wnt路径激活时, 就可能造成很多细胞出现灾难性改变, 使细胞发生异常增生和分化, 造成肿瘤形成。; Wnt路径异常激活关键见于: 1）组成Wnt路径蛋白、转录因子或基因被破坏或变异, 造成该路径关闭或局部路径异常活跃; 2）过多Wnt信号使整个路径异常活跃, 细胞进行无须要增殖; 3）细胞内其她原因经过Wnt路径来刺激或诱发细胞产生异常反应。; 在Wnt路径中,β-catenin-TCF/LEF复合体无疑是Wnt路径枢纽。如前所述, Wnt路径激活是以β-catenin定位改变-易位为基础, 一旦β-catenin易位于细胞核内, 与TCF/LEF结合, 即可开启Wnt路径。所以, Wnt路径调控可分为两部分: 上游各组分结构和功效改变造成β-catenin降解障碍, 引发β-catenin胞浆内积聚; 核内β-catenin激活TCF/LEF引发下游靶基因转录, 经过推进细胞周期发展或产生异常蛋白, 使细胞发生癌变。; β-catenin是第一个被确定为Wnt路径组员。在细胞内,β-catenin含有二个定位池: 一个是位于细胞膜,与E-cadherin和α-catenin形成粘附复合体, 参与细胞黏附; 另一个则在胞浆。β-catenin基因定位于3p21, 由16个外显子组成, 其中外显子3第37, 33, 41, 45位密码子编码区域组成β-catenin蛋白NH2末端, 是GSK3结合部位, 也是致癌活化位点, 该区域定向突变或缺失可造成β-catenin活性过高, 致使GSK3对β-catenin降解受阻, β-catenin在胞浆内积聚。Clements对311例胃癌标本进行β-catenin检测, 发觉29%病例存在β-catenin核内易位, 19%存在3号外显子突变。; 研究发觉, 很多肿瘤中存在着不一样程度β-catenin基因突变。如结直肠癌、肝细胞癌、甲状腺癌、卵巢癌和皮肤癌,β-catenin突变率可达50％以上, 前列腺癌、子宫内膜癌和Wilms’瘤等为15％左右, 胃癌为26％。突变位点多集中在外显子3区域, 尤其是GSK3结合部位。β-catenin定位改变, 除了受其本身基因突变影响外, Wnt路径上游各组分形态和功效改变也可影响β-catenin状态。关键包含Wnt,APC,GSK-3和Axin。; APC(adenomatous polyposis coli)是一个与结肠癌发生相关抑癌基因。定位于5q21, 长度10.4kb, 编码一组较大多结构域蛋白, 属于胞浆蛋白, 含有支架蛋白作用。APC蛋白、Axin和GSK3,可与β-catenin形成复合物, 而促进β-catenin发生磷酸化, 使β-catenin得以被蛋白酶降解。在固有和散在大多数结直肠肿瘤中, 均已发觉有APC基因突变或缺失。APC基因突变可发生于任何外显子, 其中以第15外显子（654-2843密码子）最为常见［2000］, 1020-1169密码子和1323-2075密码子编码区域被认为是β-catenin与APC结合位点, 该区域突变即造成β-catenin不能与APC结合, 进而不能被GSK3磷酸化, 以致β-catenin降解受阻而积聚于胞浆。所以APC是Wnt路径负调控因子。在其她癌症如髓母细胞瘤, 侵袭性纤维瘤病, 乳腺癌等也可见APC异常。; Axin含有多个蛋白-蛋白作用域, 与APC一样起支架蛋白作用, 是支架蛋白复合体构建基础。AxinRGS功效域(regulators of G protein signaling domain), 能与全长APC结合, 但不能与截短无活性APC结合。APC-A