高效液相色谱实验步骤和方法开发.ppt

液相色谱的应用以及方法开发;提纲：;一.HPLC的广泛应用;HPLC的广泛应用;HPLC的应用领域;HPLC的应用领域;HPLC 的应用领域;HPLC的应用领域;二.方法开发的过程;第一步干什么?;分析时要了解哪方面的情况？;分离(制备)时要了解哪方面的情况？;使用文献方法注意点;一）选择HPLC检测器;用于HPLC的检测器;理想的HPLC检测器;灵敏度：信噪比;选择液相色谱的检测器;选择液相色谱的检测器;吸光度（ UV/Vis）检测原理;吸光度（ UV/Vis）检测的应用;背景吸收的影响;光电二极管矩阵（Photo Diode Array） ;光电二极管矩阵检测器（ PDA ）的特点和用途;荧光（Fluorescence）检测原理;荧光检测器原理;荧光检测器的应用;示差折光（Refractive Index）检测; 示差折光（RI ）检测 的原理;示差检测器的应用;蒸发光散射（ELSD）原理;ELSD － 优点及应用领域;ELSD － 缺点;二）色谱基本分类;分配色谱;分配色谱的分离机理;分配色谱概述;流动相极性;流动相洗脱强度;流动相的选择原则;三）方法开发的具体步骤;反相色谱的方法开发;1.改变容量因子 K’;同样强度的不同溶剂，改变了流动相α值 改变色谱柱;离子型化合物的色谱分离;3.离子抑制色谱;离子抑制色谱实例;离子抑制色谱的使用范围;4.离子对色谱法;离子对色谱机理; 抗组胺及减充血剂药物的分析;离子对色谱分析水溶性维生素;用离子对、还是用离子抑制方法？;方法开发的其他因素;色谱方法转换; 四）液相色谱方法开发;在这一部分您将学习:;液相色谱泵;梯度的洗脱方式;梯度滞后：系统体积的影响;梯度滞后大小的影响;滞后体积变化的影响;色谱柱反压变化对梯度实验的影响;梯度洗脱的特点;一般流出问题;Analytical Education Center;梯度运行中发生了什么?;梯度方法开发- 优化溶剂梯度;0;梯度形状;Analytical Education Center;梯度平衡时间的影响（一）;梯度平衡时间的影响（二）;改变流速;流出顺序变化 - 一个梯度洗脱现象;;正确的柱长是多少?;结论;开发液相色谱方法的考虑因素