2 遗传专题复习 天津四中 杨贵祝2.pptVIP

（2）部分基因文库的构建： 生物发育的某个时期的mRNA cDNA文库 反转录形成CDNA片段 CDNA片段与载体连接 分别导入受体菌储存 两种基因组文库有何区别？ 1、文库的大小不同 3、文库中可用于物种间基因交流的基因种类不同 2、文库中基因的结构有所不同 （二）用PCR技术扩增目的基因 PCR技术： 在体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 PCR原理： PCR所 需条件： 模板DNA、四种脱氧核苷酸 热稳定DNA聚合酶、引物 双链DNA复制原理 DNA 复制有何特点？需要什么条件？ PCR能不能也用解旋酶给DNA来解旋？ PCR的过程： 1.变性: 加热至90-950C使DNA解旋 2.复性: 冷却至55-600C使引物与DNA单链结合 3.延伸: 加热至70-750C在热稳定DNA聚合酶的作 用下合成子链 解旋所需温度与什么因素相关？ （三）人工合成目的基因 1、反转录人工合成目的基因 2、化学法直接合成目的基因 以信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下以脱氧核苷酸为原料合成DNA 依据蛋白质的氨基酸顺序 推测出信使RNA核苷酸顺序 推测基因的脱氧核苷酸顺序 直接合成相应的基因 思考：以上三种方法得到的基因能不能直接用于转基因？为什么？ 二、基因表达载体的构建 目的基因 运载体 + 基因表达载体 构建基因表达载体的目的： 1、稳定的存在、遗传给后代——能复制 2、发挥作用—