以DC为基础的肿瘤疫苗策略.ppt

2010.12.31;;树突状细胞 dendritic cell; DC ;CD34骨髓干细胞;肿瘤疫苗 dendritic cell vaccine DC vaccine;肿瘤疫苗的研究进展;理论基础的奠定 1971 Burnet Thomas 免疫监视学说;肿瘤疫苗研究的飞跃 20世纪末 90年代初以基因修饰肿瘤细胞为基础的疫苗发展 肿瘤疫苗真正成为能够应用于临床的肿瘤治疗方法 1997年 美国Jefferson大学 约60％的黑色素细胞瘤转移患者注射肿瘤疫苗后存活5年以上 1998年 波士顿研究人员 制成一种经生物工程改造的肿瘤疫苗，它包含一种可以刺激机体免疫系统，使Ｔ细胞保持较长时间的攻击力。 ;（一）全肿瘤细胞疫苗 ????1、经物理、化学等方法处理的疫苗　 ????2、转基因疫苗　 ????3、感染病毒类疫苗　 ????4、细胞融合疫苗　 （二）肿瘤抗原及抗原类分子疫苗　 该类疫苗的研究最为广泛,该类疫苗特异性高,但免疫原性低 1、抗原疫苗　 2、多肽类疫苗　 3、抗独特型抗体疫苗　 4、热休克蛋白—肽类复合物疫苗　 （三）核酸疫苗　 （四）重组病毒、病菌疫苗　 （五）树突状细胞疫苗　 ;肿瘤疫苗新热点 近10年来 以树突状细胞为基础的肿瘤抗原特异性疫苗 ;转基因疫苗 ;美国密执安大学、瑞士苏黎世大学等应用树突状细胞分别携带乳腺癌 、黑色素瘤抗原制备疫苗 Dukes大学则应用肿瘤细胞ＲＮＡ转导ＤＣ细胞 均已进入Ⅰ期或Ⅱ期 临床试验。;2005年 中山大学肿瘤医院 研发出一种除了干细胞移植、化疗等常规治疗方法外的白血病治疗方法——白血病DC疫苗 已在14位患者身上获得明显疗效，国内尚属首创。;1） 肿瘤的免疫原性较弱, 并具有抗原调变能力 ;2）MHC-I类分子表达下降或消失。 B7，ICAM-1等共刺激分子在癌细胞上的表达异常； ;肿瘤细胞高水平表达包括唾液酸在内的粘多糖或其他的凝聚系统；血清中的封闭因子（封闭抗体）封闭肿瘤表面抗原表位。;漏逸的少量肿瘤细胞不能引起足够的免疫应答，反而可以刺激肿瘤不断生长，产生免疫刺激。 存在于某些肿瘤组织内的淋巴细胞可以为肿瘤细胞提供某些肿瘤营养因子并刺激肿瘤细胞生长。;Sakaguchi ’ 等在1995年发现鼠源性的CD4CD25 双???性T细胞亚群，能通过细胞与细胞间接触以及分泌细胞因子显著抑制多种免疫细胞的功能。 局部微环境的肿瘤抗原可显著诱导特异Treg细胞生成，称为肿瘤特异Treg细胞。 很多资料显示Treg细胞在肿瘤微环境及患者外周血中富集存在。;肿瘤免疫抑制因子可以使肿瘤细胞躲避局部免疫效应细胞的攻击，还能进入外周血循环，抑制宿主全身抗肿瘤免疫功能。 Lyon 小组应用“微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array，CBA)”对35例确诊乳癌患者及24例疑似患者的样本进行了检测对比，得出在所测的IL-1B、IL-2、IL4、IL-5、IL-6、 IL-7、IL-8、IL-10、IL-12 (p70)、IL-13、IL-17、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、MCP-1、MIP-1 B和TNF-α细胞因子中，除了GM—CSF，INF-γ 外，其他因子都有显著的增高。;;1) 未成熟DC 与肿瘤细胞的直接接触影响了DC 的成熟; 2) 肿瘤细胞释放的可溶性免疫抑制因子影响着全身的DC 的成熟和功能, 包括VEGF、TNF-α、TGF-β 、 M-CSF、GM-CSF、I L-6 和IL-10 等 。;;;以DC为基础的肿瘤疫苗策略;以DC为基础的肿瘤疫苗策略;*;以DC为基础的肿瘤疫苗策略;1.肿瘤细胞/肿瘤细胞提取物冲击DC;1.肿瘤细胞/肿瘤细胞提取物冲击DC;;1.肿瘤细胞/肿瘤细胞提取物冲击DC;2.蛋白质冲击DC;3.肿瘤抗原肽冲击DC ;;4.肿瘤抗原DNA/RNA冲击DC ;;;DC的来源;;;DC的来源——外周血;其端粒及端粒酶活性均长于和高于BM 及PB HSC/ HPC ,并且低表达或不表达细胞凋亡配基CD95/ Fas ,故体外生存期更长;;分离纯化;DC的培养基;细胞因子;IL-4;TNF-α;DC的鉴定;DC的鉴定;DC体外培养技术;;展望;*