白细胞计数和分类课件.ppt

. 3.器材 光学显微镜 推片，载玻片 [试剂] Wright染液 Wright 1.0g 甲醇 600ml 磷酸盐缓冲液（PH6.4～6.8） 香柏油 [标本来源] EDTA-K2抗凝全血 3．白细胞分类： 细胞分布均匀的体尾交界处，滴加香柏油一滴，油镜下分类计数。分类时要有秩序的连续进行，避免主观选择视野。通常分类计数100个白细胞，计算并报告各种白细胞所占比例。 结果记录方式： Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正 中性粒细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，胞浆染粉红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。 各类成熟白细胞的形态学： . . . . 诊断学-实验一 白细胞计数 浙江中医药大学附属二院 实验一、 白细胞计数  1.原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数，换算成每升血液中白细胞数。 2.试剂器材 白细胞稀释液：冰乙酸 2.0ml 　 10g/L亚甲蓝 3滴 加蒸馏水 至100ml 器材 　 改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片、微量吸管、带孔吸头、1ML刻度移液管、小试管、洁净软纱布、干棉球、光学显微镜。 毛细血管采血标准操作程序 操作步骤： 1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜，半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧采血。 2 轻轻按摩采血部位。 3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。 4 紧捏刺血部位，使其自然充血。 5 用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深度 2～3mm，稍加挤压以血液流出为宜。 6 用干棉球擦去第一滴血。 7 按需要依次采血。 8 采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片刻。 微量吸管的使用 1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气； 2拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指轻微挤压排出适量空气； 3将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血液会吸入吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指； 4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确），轻触吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度； 5将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液，用上清液冲洗管内余血2-3次，轻摇试管混匀； 6拔出微量吸管弃入污物桶。 3.操作步骤 （1）加稀释液 用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。 （2）采血、稀释　用微量吸管采血20ul，拭去管外余血，释放于小试 管底部，用上部稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管混匀，静置等其溶血。 （3）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。 （4）充计数池　将小试管轻微振荡2min，立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白细胞悬液，充入计数池内。静置2-3min，使细胞沉于计数池底面。 （5）调试显微镜 将计数板放置载物台上，选择（4 × ）低倍镜，调节聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜（10×），调节光亮 。 （6）计数 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数，压线细胞数上不数下，数左不数右。 结果计算 白细胞总数 =4大格白细胞数（N） /4×10 ×20 ×106 　　　　　　 = N÷ 20 ×109/L 用△. △ ×109/L（小数点后一位）表示 5细胞计数原则 大方格四边压线细胞数左不数右，数上不数下， 弓形移动 实验报告内容 原理 试剂器材 操作步骤 实验结果 讨论 诊断学 实验二 白细胞分类 1.分类原理：白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数。通常分类100个白细胞，计算得出各种白细胞所占百分比 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 2.瑞氏染色原理：瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性美兰（M+）和带负电的酸性伊红（E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可呈不同的着色特点。 . . . .