选修1第一部分第2课时.pptx

;XUE XI MU BIAO;NEI RONG SUO YIN;;一、实验原理 1.脲和脲酶 (1)脲：又称尿素，是 降解的产物。人和其他哺乳动物的尿中都含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。 (2)脲酶：降解 的酶。 (3)以尿素为氮源的微生物的特点：含有 ，通过 尿素作为其生长的氮源。其利用尿素的反应式为：(NH2)2C==O＋H2O ＋CO2。;2.实验目的 (1)使用专一的培养基(含有 )分离专一的细菌(有 的细菌)。 (2)利用指示剂颜色的变化检知酶( 酶)所催化的反应。 3.实验原理 (1)不同微生物利用的氮源种类 ，有一些细菌含有 酶，通过降解尿素作为其生长的 源。 (2)尿素在脲酶的作用下降解产生 ，使培养基的pH ，培养基中的酚红指示剂变成 色。;4.两种培养基的比较;上述属于选择培养基的是 。用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基的原因是：琼脂中含有少量 ，用琼脂糖代替琼脂作为微生物培养基的固化剂，是为了尽可能使培养基中只含 一种含氮化合物，以防止琼脂中的 被不能以尿素为氮源的细菌利用，有利于对以尿素为氮源的细菌的筛选。;能在选择培养基上生长的不一定是目的菌;例1　(2018·温州高二检测)下列有关尿素培养基的叙述，错误的是 A.根据物理性质划分，该培养基属于固体培养基 B.培养基中的唯一氮源为尿素，用以筛选以尿素为氮源的微生物 C.培养基中的酚红，用于鉴别以尿素为氮源的微生物 D.培养基中加入G6玻璃砂漏斗过滤的尿素后，要用500 g/cm2压力(90 ℃以上) 灭菌30 min;例2　尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用。 某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下表： ;解析　含有脲酶的细菌通过降解尿素作为其生长的氮源，从而也起到维持生物圈氮元素平衡的作用，脲酶分解尿素的反应式为：(NH2)2C==O＋H2O 2NH3＋CO2。 ;(2)根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_____(填“能”或“不能”)，原因是___________________________________ _____________________________________________________________。;(3)尿素在高温下容易分解，因此常用______________对尿素进行过滤灭菌，而该器材在进行过滤灭菌操作前应使用______________法进行灭菌。;筛选菌株的原理;二、实验操作与分析 1.实验中的对照设置 (1)实验组：以 培养基进行培养。 (2)对照组：以 培养基进行培养。;2.实验步骤;3.实验结果;(1)稀释度为 的培养基中的平均菌落数多。 (2)在相同稀释度的情况下，尿素培养基中的平均菌落数 于LB培养基中的平均菌落数，其原因是 。 (3)在尿素培养基上的菌落周围会出现 的环带。;1.样品稀释的问题 (1)稀释原因：样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。 (2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30～300之间，便于计数。 2.与涂布平板有关的问题 (1)防止培养基外溅：在倒平板的过程中，不能将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 ;(2)涂布器的灭菌：玻璃刮刀用70%酒精消毒，取出时，多余酒精在烧杯中滴尽，沾有少量酒精的玻璃刮刀在酒精灯火焰上引燃。 (3)设置对照：可排除实验中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 3.酚红指示剂的选择 本实验中，酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色的pH范围是6.4～8.2，在酸性条件下呈黄色，碱性条件下呈红色。 以尿