电泳技术和常用电泳仪【精品PPT课件.ppt

第四节 毛细管电泳的基本结构和分离模式 （五）毛细管等速电泳 毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电泳淌度的前导电解质，然后进样，随后再导入比各分离组份低电泳淌度的尾随电解质，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中发生分离。 第四节 毛细管电泳的基本结构和分离模式 （六）毛细管电色谱 它包含了电泳和色谱两种机制，是在毛细管中填充 或在毛细管壁 上键合（或涂壁）固 定相，从而构成毛细 管色谱柱，依靠电渗 流推动流动相，携带 样品迁移，根据样品 分子的质荷比、分子 尺寸及分配系数的差 别而分离。 06-13 CEC-加压毛细管电色谱仪 第四节 毛细管电泳的基本结构和分离模式 五、毛细管电泳仪的基本结构 毛细管电泳仪的结构并不复杂，主要有高压源、毛细管柱、检测器，以及两 个供毛细管两端插入而又可 和电源相连的缓冲液槽。 （一）毛细管柱 （二）检测器 （三）毛细管电泳 法的进样技术 06-14毛细管电泳仪 第四节 毛细管电泳的基本结构和分离模式 六、常用各种电泳仪简介 （一）稳压稳流电泳仪 稳压稳流电泳仪是中压电泳仪。其输出电压的调节范围为0V～600V、输出电流为0mA～100mA。该机工作稳定性好、调节范围宽，并设有完善的短路保护电路和过流保护电路，是目前国内中、低压电泳实验中应用最广泛的电泳仪之一。 06-15 稳压稳流电泳仪 第四节 毛细管电泳的基本结构和分离模式 （二）全自动醋纤膜电泳仪 全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪，有可见光单系统，使用醋酸纤维薄膜电泳片，优点为自动化程度高。只需将样品、试剂、电泳片放好，人员可离机完成实验并得到结果。 第四节 毛细管电泳的基本结构和分离模式 （三）全自动荧光/可见光双系统电泳仪 全自动荧光/可见光双系统电泳仪为全自动电泳仪，具有荧光/可见光双系统，在使用荧光试剂项目如CK、LD同工酶时为全自动。只需将样品、试剂、琼脂糖凝胶电泳胶片放好后，操作人员可离机完成实验并得到结果。 第六章 电泳技术和常用电泳仪 第六章 电泳技术和常用电泳仪 一、概述 generalization) 电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术（electrophoresis technique）。可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪（electrophoresister）。 第六章 电泳技术和常用电泳仪 目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定，甚至还用于细胞与病毒的研究。 临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和毛细管电泳等。 第一节 电泳原理 一、电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相 等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子），不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一定的电场 中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可 使它们分离。 06-01电泳现象和电渗流现象。 第一节 电泳原理 若将带净电荷Q的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引力为： F引=E Q （6-1） 在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻 F阻=6πrηV （6-2） 当F引=F阻时 EQ= 6πrηV V = EQ/6πrη （6-3） 由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电场强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶液的粘度(η)成反比。 第一节 电泳原理 二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度 （二）溶液的pH值 （三）溶液的离子强度 （四）电渗作用