免疫磁珠分离技术.pdfVIP

磁珠分离技术 一、原理 免疫磁珠法分离细胞基于细胞表面抗原能与连接在磁珠上的特异性单抗相结合， 在外磁 场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中， 无该种表面抗原的细胞由于不能 与相连着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性， 不在磁场中停留， 从而使细胞得以分离。 免疫 磁珠法分正选法和负选法，也称阳性分选法和阴性分选法。正选法 -磁珠结合的细胞就是所 要分离获得的细胞；负选法 -磁珠结合的细胞为不需要细胞。一般负选法分选较为常见，因 为此方法获得的所需要的细胞表面不含有抗体及磁珠的干扰。现以两步法分选小鼠 CD4+ CD25+ T细胞的分选为例分别介绍负选法、正选法如下。 1、材料试剂： 1、生物素化的，小鼠 CD4 阴性分选抗体混合物 [cocktail ，内含抗 B 细胞（ CD45R，B220）、 CD8+T 细胞（ CD8a，Ly-2）、造血细胞（ CD11b,Ma