mtt法检测细胞活力讲解.pptVIP

MTT法检测细胞活力讲解;MTT法目和意义;原理; ;贴壁细胞操作步骤; 4. 每孔加入10ul MTT溶液（5mg/ml, 即0.5%MTT）, 继续培养4h。若药品与MTT能够反应, 可先离心后弃去培养液, 小心用PBS冲2-3遍后, 再加入含MTT培养液。 5. 终止培养, 小心吸去孔内培养液。 6. 每孔加入100ul二甲基亚砜（置摇床上低速振荡10min, 使结晶物充足溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔吸光值。 7.同时设置调零孔（培养基、MTT、二甲基亚砜）, 对照孔（细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜） ;悬浮细胞操作步骤: ;药品配制;MTT配制;试验结果统计学处理;试验结果统计学处理;举例;注意事项;试验前应明确问题;2.药品浓度设定。一定要多看文件, 参考他人结果再定个比较大范围先初筛。依据自己初筛结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记! 不然, 可能你用时间和浓度根本不是药品有效浓度和时间。 3. 时间点设定。在不一样时间点测定OD值, 输入excel表, 最终得到不一样时间点抑制率改变情况, 画出改变曲线, 曲线什么时候变得平坦了（到了平台期）那个时间点应该就是最好时间点（因为这个时候细胞增殖抑制表现最显著）。;4.培养时间。100ul培养液对于104～5次方增殖期细胞来说, 极难维持68h, 假如营养不够话, 细胞