免疫细胞的分离技术.pptVIP

CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的分化 Foxp+T调节细胞可以从胸腺直接分化，也可在TGF-?作用下从Foxp3-T细胞分化。 调节性T细胞Regulatory T cells，Tr 第三十一页，共75页 玫瑰花结法（E花环沉降法） 尼龙毛柱分离法 淘洗法 免疫磁珠法 流式细胞术分选法 （二）T淋巴细胞及其亚群的分离 第三十二页，共75页 人T淋巴细胞表面表达CD2分子，即绵羊红细胞受体， B细胞则无。在适当的条件下，可与绵羊红细胞（SRBC）结合，形成玫瑰花结（rosette）,因为红细胞环绕T细胞，形似花环，所以又称E-花环（E-rosette） 该实验常用于临床检测人外周血T淋巴细胞的数量和比例，由此可间接反映机体的细胞免疫功能状况 玫瑰花结法 第三十三页，共75页 淋巴细胞 + SRBC悬液 → 37°C水浴 10 min → 低温低速离心 → T细胞形成E花环而沉于管底 → 悬液中为B细胞。 方法 　 第三十四页，共75页 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，而T细胞不与尼龙毛粘附的特性，这是获得富含T细胞群的有效方法 尼龙毛柱分离法 第三十五页，共75页 简单，快速，经济，尼龙毛可反复利用 可分离大量细胞 细胞不会被激活，可用于功能测定 纯度不高 耗时 优点 　 缺点 　 第