实验一母种培养基配制及棉塞制作;三.实验准备
1.器具:??天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。
?2.材料:??马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。
四、实验内容
过程:制马铃薯滤液→融化琼脂→培养基的分装 →棉塞的制作
方法步骤:;1.配方(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,自来水1000ml,pH自然。
?2.制作方法
(1)???滤液:??马铃薯刮去粗皮,去芽眼,切成碎块,称量后放锅中,加水1200~1300ml,将其煮沸20min。用双层纱布过滤,取1000ml滤液。
;(2)化琼脂:??将滤液加热至将沸腾时加入琼脂,不断搅拌,注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入剩余原料,并使其溶解(用热水补足水量).
; 装量以不超过其容积的一半为宜)。注意管口或瓶口不要沾染培养基。
(4)制棉塞??棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉,将其卷成棉塞,最好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑,外包的纱不能折、松紧适宜等。;A.正确; B.不正确;(5)?包扎:??管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆,棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称,制备组别和姓名、日期等。
(6)、灭菌
(7)、摆斜面
(8)、存放冰箱(4-6C)
?六、作业
1、简述高压灭菌锅的使用。
2、何谓灭菌?简述热力灭菌的类型和原理。
3.何时加入琼脂?融化时注意什么问题?分装的技术要求有哪些?
?4. 棉塞的作用有哪些和技术要求?菌种培养时管口堵胶塞或软木塞行吗?为什么?
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