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实验三十一 实验三十一 目的基因与载体的限制性双酶切 (Double Enzyme Digestion for Target Gene and Vector ) 实验目的 • 掌握限制性内切酶切割DNA的原理和基 本技术，用限制性内切酶BamH Ⅰ和 HindⅢ切割目的基因和质粒载体，为后 续连接做准备。。 实验原理 • 限制性核酸内切酶能特异地识别和切割双链DNA 中的碱基序列，形成一定长度和顺序的DNA片段。 • 本实验采用两种限制性核酸内切酶（BamH Ⅰ和 HindⅢ），切割目的基因（PCR扩增产物）和质 粒载体pQE30。 • 其中BamH Ⅰ的识别序列和切口是： G ↓GATCC，HindⅢ的识别序列和切口是： A ↓AGCTT 。 实验操作 1.取干净的小离心管，按如下反应体系配制溶液 试剂