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分子荧光光度法 第一页，共19页 第一节 概 述 一、光致发光 物质分子吸收特定波长的光能后，由基态跃迁至激发态。处于激发态的物质分子是不稳定的，可能通过辐射（发光）或非辐射的形式放出多余的能量，由激发态重新回到基态。物质分子吸收外来光被激发后所产生的发光现象，叫光致发光。 荧光 10-9~10-6s 实用 磷光 10-3~10s 不实用 二、荧光光度法 利用测量荧光强度而建立起来的一类测定物质含量的分析方法，称为荧光光度法，即荧光法。 第二页，共19页 优点：灵敏度高，10-7~10-9g/ml，比紫外分光光度法灵敏度高10~1000倍。 第二节 基本原理 一、荧光的产生 基态 激发光 激发态 去激发 基态 （一）激发 处于基态的物质分子吸收光能时，其电子对中的一个电子被激发到某一较高能级。 基态单重态 所有电子都自旋配对的分子电子态。 激发态 激发单重态 S1 S2 …… 激发三重态 T1 T2 …… (二)去激发 指分子中处于激发态的电子以辐射或非辐