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分光光度计的使用 第一页，共16页 分光光度法的概念 分光光度法：是利用物质特有的吸收光谱，进行物质鉴定及测定其含量的一种分析技术。也称为吸收光谱法。是光谱分析技术中最常见的一种，应用最多的是紫外及可见分光光度法。 特点：灵敏、精确、快速和简便。 应用：生物化学微量物质定量分析测定研究中广泛使用的方法之一，常用于糖，蛋白质，核酸，酶等的快速定量检测。 光谱范围：200～1000nm 。 第二页，共16页 分光光度法的概念 红外分光光度计:大于760 nm的红外光区 可见光分光光度计:400～760 nm的可见光区 紫外分光光度计: 200～400 nm的紫外光区 分光光度计的分类 第三页，共16页 722E可见分光光度计 第四页，共16页 722E可见分光光度计 第五页，共16页 分光光度计的基本结构 光源 单色 光器 吸收池 检测 系统 钨丝灯 氢灯 氘灯 棱镜 衍射光栅 玻璃比色杯 石英比色杯 硒光电池 光电管 光电倍增管 第六页，共16页 第七页，共16页 当一束单色光透过溶液时 部分被吸收 部分被反射 部分被透过 Ir Ia I 入射光 I0 出射光 I 比色皿 吸收杯 反射光 Ir Ia 吸收光 分光光度计基本原理 第八页，共16页 Ｉ/ I0表示光线透过溶液的程度,称为透光度,用T表示；－IgT表示溶液对光线的吸收程度，用吸光度（A）表示。即 I