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C1086细胞凋亡 - 一步法 TUNEL检测试剂盒 一步法 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 产品编号 C1086 产品名称 包装 一步法 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 ( 绿色荧光次 产品简介： ? 碧云天生产的一步法 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 (One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit) 为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗 涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检 测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 ? 细胞在发生凋亡时，会激活一些 DNA内切酶，这些内 切酶会切断核小体间的基因组 DNA。细胞凋亡时抽提 DNA进行电泳 检测，可以发现 180-200bp 的 DNA ladder 。基因组 DNA断裂时，暴露的 3’-OH 可以 在末端脱氧核苷酸转移酶 (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上 绿色荧光探针荧光素 (FITC) 标记的 dUTP(fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或 流式细胞仪进行检测，这就是 TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞 凋亡的原理。 注： FITC 是 fluorescein isothiocyanate 的缩写，实际上大多数情况下所 谓的 FITC 即为 fluorescein 。 ? 本试剂盒有如下优点。 (1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由 于凋亡早期就有 DNA断裂，可以检测到 早期的细胞凋亡。 (2) 特异性： TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标 记坏死细胞。 (3) 快速：仅需约 1-2 个小时即可完成。 (4) 方便：只需一步染色反应，洗 涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。 (5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石 蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。 ? TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的 DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的 DNA 断裂 ( 和细胞凋亡时的断裂方式不 同) 。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生 DNA 断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。 ? 极少数细胞凋亡时没有 DNA断裂，此时不适用 TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现 TUNEL检测呈阳性。在需 要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。 ? 本试剂盒足够检测 20 个样品。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 酶 C1086-2 荧光标记液 960 μl 酶稀释液 ( 选用— 说明书 1 份 保存条件： - 20℃保存，荧光标记液需避光保存。 注意事项： ? ? ? 1. 需自备用于洗涤细胞的 PBS或 HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液 (P0126) ，用于 固定的 4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液 (P0098) ，同时需自备含 0.1 ％ Triton X-100 的 PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液 (P0106) 。 如果用于石蜡切片的检测，需自 备蛋白酶 K，二甲苯。蛋白酶 K(ST533) 可以向碧云天订购。 为了您的安全和健康，请穿 实验服并戴一次性手套操作。